背景及目的:随着中国经济文化的发展,乳腺癌已经逐渐变成主要影响我国女性身体健康的恶性肿瘤之一。在乳腺癌的众多亚型中,三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer,TNBC）因为其容易转移,且易于侵袭的特性,被认为是恶性程度最高、并且预后相对较差的乳腺癌亚型。而三阴性乳腺癌则因为缺乏特定的小分子靶点,靶向治疗、内分泌治疗等方法均无明显效果。在乳腺癌进展中,乳腺组织周围包裹大量脂肪细胞,这些脂肪细胞在乳腺癌细胞影响下逐渐去分化并构成特殊的肿瘤脂肪微环境。赖氨酸羟化酶2（PLOD2）是构成胶原交联的重要分子,可参与细胞外基质形成,稳定胶原交联过程。本课题主要目的是探究脂肪微环境内,PLOD2对三阴性乳腺癌中的细胞迁移和侵袭的影响,并进一步分析PLOD2调节三阴性乳腺癌迁移能力的潜在机制,以期为三阴性乳腺癌的治疗提供新的研究视角。方法:使用TCGA数据库分析PLOD2在多种肿瘤和不同乳腺癌亚型中的表达差异。将3T3-L1细胞诱导为成熟的脂肪细胞后与三阴性乳腺癌细胞共培养3天对比PLOD2的表达差异,并采用Transwell细胞迁移实验检测脂肪微环境对乳腺癌细胞迁移的影响,利用侵袭实验验证脂肪微环境对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。接下来采用seahorse实验探究PLOD2对三阴性乳腺癌氧化磷酸化和糖酵解代谢的影响,并通过蛋白质免疫印迹法和实时荧光定量PCR验证PLOD2与糖酵解相关酶表达的相关性,利用细胞迁移进一步分析PLOD2是否可以通过调节糖酵解过程影响肿瘤细胞迁移能力,以及PLOD2调控糖酵解的具体机制。结果:TCGA数据库数据分析显示PLOD2可在乳腺癌中异常表达,其中在三阴性乳腺癌内的表达水平显著上升。在乳腺癌-脂肪细胞共培养模型中,乳腺癌细胞内PLOD2的表达水平有明显上升,此外,迁移实验和侵袭实验也表明脂肪微环境下促进了乳腺癌细胞迁移和侵袭能力。通过海马实验分析敲低PLOD2和过表达PLOD2的三阴性乳腺癌代谢水平变化,结果表明,过表达PLOD2可促进MDAMB-231和MDA-MB-468细胞氧化磷酸化和糖酵解代谢水平,而敲低PLOD2后乳腺癌细胞内糖代谢水平有所下降。采用TCGA数据库筛选出与PLOD2与糖酵解关键酶相关性较强的PGK1、LDHA、PGAM1和PFKP,通过蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR分析敲低PLOD2和过表达PLOD2后的乳腺癌细胞内糖酵解相关酶的表达变化进一步验证这一结果。给予糖酵解抑制剂2-DG处理敲低或过表PLOD2后的三阴性乳腺癌细胞,结果表明,敲低PLOD2后给予2-DG不会进一步抑制乳腺癌细胞的迁移能力,而过表达PLOD2后乳腺癌细胞迁移能力增强,再通过2-DG处理可以进一步抑制细胞迁移水平。通过TCGA筛选出与PLOD2相关可调节糖酵解相关酶的转录因子STAT1、STAT2、STAT3,在敲低和过表达PLOD2后的乳腺癌细胞系中进行验证。结论:脂肪微环境中三阴性乳腺癌细胞内PLOD2异常表达,伴随着肿瘤细胞迁移和侵袭能力增强。PLOD2可通过调节三阴性乳腺癌糖代谢重编程,影响三阴性乳腺癌细胞迁移能力。