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目的：
本研究临床试验通过头穴丛刺治疗中风后肢体痉挛，评价头穴丛刺在改善患者肢体痉挛程度、运动功能及日常生活能力的影响。动物实验主要以头穴丛刺对大脑中动脉闭塞后肢体痉挛大鼠模型进行干预，探析头穴丛刺对抑制性神经递质GABA及其受体GABAA、GABAB的表达，及对BDNF/Trkb-KCC2信号通路的影响，探究头穴丛刺治疗中风后肢体痉挛的可能作用机制。
方法：
临床研究：将72例确诊为中风后肢体痉挛患者，按随机数字表法随机分为头针组和对照组，对照组仅采用单独运动疗法治疗，头针组在对照组运动疗法基础上在顶区和顶前区选取5条穴线加用丛刺治疗，每次留针6小时，两组患者均每日治疗1次，每周治疗5天，共治疗4周。干预4周后，使用改良Ashworth评分表（modified Ashworth scale,MAS)对两组患者肌张力分别进行评定，使用简化的Fugl-Meyer运动功能评定表（Fugl-Meyer motor assessment,FMA)对两组患者运动功能分别进行评价，通过改良巴氏指数（modified Barthel index,MBI)评价患者日常生活能力。在治疗前（-3~0天）、治疗后（第4周±3天）各评价一次。研究人员采用SPSS26.0统计分析软件，对研究所得结果数据进行处理分析。其中，所得计量资料数据以均数(?x)±标准差(s)的形式表示,各组组间进行比较采用独立样本t检验，而组内治疗前后结果对比则采用配对t检验;计数资料组间比较采用χ2检验;检验水准α=0.05。
动物实验：将25只大鼠随机分为对照组5只，模型组10只和头针组10只。对照组常规喂养，不做任何处置，而对模型组和头针组大鼠采用大脑中动脉栓塞方法（MACO）进行脑缺血模型造模。头针组大鼠造模24h后对其采用头穴丛刺法在大鼠百会及左右侧各旁开2mm处针刺，快速捻转1min后留针2h，每日1次，共14d；模型组大鼠造模后正常饲养，每日给予头针组相同强度及时间的抓摸刺激；对照组每日仅给予同头针组相同强度及时间的抓摸刺激。造模24h后对各组大鼠采用Zealonga评分对其神经功能损伤情况进行评价，造模24h及干预14d后对各组大鼠分别采用Narrow ally test进行行为学评价，并采用BL-420S生物机能实验系统检测各组大鼠肌张力。干预14d后，采用TTC染色测定大鼠脑梗死体积。应用石蜡切片及免疫荧光双标测定大鼠梗死区脑皮质内GABA及其受体GABAA和GABAB的表达情况，采用免疫荧光法检测三组大鼠梗死部分脑皮质中Trkb及KCC2表达，采用Western Blot检测三组大鼠梗死区脑皮质中BDNF含量及Trkb含量表达。采用SPSS26.0软件进行统计学分析，采用Graphpad Prism9.0对统计结果进行描述。
结果
1.临床研究：
临床研究结果显示：头穴丛刺结合运动疗法治疗中风后肢体痉挛可明显降低患者患侧上肢和下肢的痉挛程度，且疗效优于单独运用运动疗法（P＜0.05）；经治疗两组患者Fugl-Meyer量表评分均明显提升，头针组与对照组相比无统计学差异，但头针组评分均值仍略高于对照组（P＞0.05）；两组均可明显提升患者日常生活活动能力，且头穴丛刺联合运动疗法明显优于单独运用运动疗法（P＜0.05）。
2.动物实验:
脑梗死模型造模成功24h后，应用Zealonga评分法对大鼠进行神经功能损伤评价。对照组未出现神经功能损伤情况，模型组与头针组相较于对照组均表现明显神经功能损伤情况（P＜0.05），而模型组与头针组则无明显差异（P＞0.05）。
造模24h后对大鼠进行Narrow ally test行为学测试结果显示：与对照组相比模型组与头针组大鼠站立向脑梗死侧转身几率明显增多（P＜0.05），而模型组与头针组两组间无明显差异（P＞0.05）；干预治疗14天后，相较于对照组，模型组与头针组向脑梗死侧转身几率仍明显偏多（P＜0.05）。与模型组相比，头穴丛刺治疗显著降低了Narrow ally test行为学评分。
在大鼠造模24h及干预14d后三组进行肌张力检测结果显示：造模24h后，对照组大鼠肌张力未明显改变；与对照组相比模型组和头针组均出现肌张力明显增高（P＜0.05）；经14d治疗后，对照组及模型组肌张力较治疗前均未明显改变，头针组治疗后较其治疗前及模型组治疗后肌张力均明显减低（P＜0.05）。
干预14d后，对大鼠脑组织切片并进行TTC染色后观察结果显示：对照组大鼠脑组织未出现梗死区域，与对照组相比，模型组和头针组可见明显梗死区域（P＜0.05）。而头穴丛刺治疗后与模型组对比，头针组梗死体积显著降低（P＜0.05）。
干预14d后，免疫荧光检测各组大鼠脑皮质GABA、GABAA、GABAB中含量结果显示：与对照组比较，模型组大鼠缺血侧脑皮质中GABA表达明显减低（P＜0.05）；与模型组比较，头针组大鼠缺血侧脑皮质中GABA表达有所提高（P＜0.05），但其表达水平显著低于对照组（P＜0.05）。与对照组比较，模型组大鼠缺血侧脑皮质中GABAA表达明显减低（P＜0.05）；与模型组比较，头针组大鼠缺血侧脑皮质中GABAA表达有所提高（P＜0.05），但其表达水平仍低于对照组（P＜0.05）；与对照组比较，模型组大鼠缺血侧脑皮质中GABAB表达明显减低（P＜0.05）；与模型组比较，头针组大鼠缺血侧脑皮质中GABAB表达有所提高（P＜0.05），但其水平同样低于对照组（P＜0.05）。
干预14d后，免疫荧光法检测各组大鼠脑皮质中KCC2及Trkb表达结果显示：与对照组相比，模型组大鼠损伤侧皮质中KCC2表达明显减低（P＜0.05），而头针组大鼠经头穴丛刺治疗后KCC2表达有所提升，与模型组相比具有统计学差异（P＜0.05）;与对照组相比，模型组损伤侧皮质中Trkb表达明显减低（P＜0.05）.而经头穴丛刺治疗,与模型组对比头针组Trkb表达进一步减低，头针组与模型组相比具有统计学差异（P＜0.05）。
干预14d后，采用Western Blot检测三组大鼠梗死区脑皮质中BDNF及Trkb含量，表达结果显示：与对照组相比，模型组大鼠损伤侧皮质中BDNF表达减低，头针组大鼠经治疗后与模型组相比BDNF表达明显上调（P＜0.05）；与对照组相比模型组损伤侧皮质中Trkb表达明显减低（P＜0.05），经头穴丛刺治疗,与模型组对比头针组Trkb表达进一步减低，与模型组相比具有统计学差异（P＜0.05）。
结论：
1.临床研究结果表明，头穴丛刺联合运动疗法治疗中风后肢体痉挛可明显减低患者患侧上肢及下肢的痉挛程度，可明显提升患者的运动功能及日常生活活动能力，表明头穴丛刺治疗中风后肢体痉挛具有临床有效性。
2.头穴丛刺疗法干预缺血性脑卒中模型大鼠，可减小脑梗死体积，减低大鼠的痉挛程度，使大鼠行动能力得到提升，对损伤神经具有保护作用。
3.头穴丛刺疗法干预缺血性脑卒中模型大鼠，可上调损伤侧皮质抑制性神经递质及其受体含量表达，减低痉挛程度。
4.头穴丛刺疗法干预缺血性脑卒中模型大鼠，可调节损伤侧皮质BDNF/Trkb-KCC2信号通路表达，BDNF/Trkb-KCC2信号通路可能是头穴丛刺疗法降低大鼠痉挛状态的作用机制。
结合临床与基础两方面研究结果可得出结论：头穴丛刺疗法对中风后肢体痉挛具有明确治疗作用，其作用机制可能与调整损伤侧脑组织内神经递质有关。头穴丛刺疗法基于中医学“形神合一”理论，依据“治神调形”法则，本研究为其治疗中风后肢体痉挛提供临床及实验证据。
本研究临床试验通过头穴丛刺治疗中风后肢体痉挛，评价头穴丛刺在改善患者肢体痉挛程度、运动功能及日常生活能力的影响。动物实验主要以头穴丛刺对大脑中动脉闭塞后肢体痉挛大鼠模型进行干预，探析头穴丛刺对抑制性神经递质GABA及其受体GABAA、GABAB的表达，及对BDNF/Trkb-KCC2信号通路的影响，探究头穴丛刺治疗中风后肢体痉挛的可能作用机制。
方法：
临床研究：将72例确诊为中风后肢体痉挛患者，按随机数字表法随机分为头针组和对照组，对照组仅采用单独运动疗法治疗，头针组在对照组运动疗法基础上在顶区和顶前区选取5条穴线加用丛刺治疗，每次留针6小时，两组患者均每日治疗1次，每周治疗5天，共治疗4周。干预4周后，使用改良Ashworth评分表（modified Ashworth scale,MAS)对两组患者肌张力分别进行评定，使用简化的Fugl-Meyer运动功能评定表（Fugl-Meyer motor assessment,FMA)对两组患者运动功能分别进行评价，通过改良巴氏指数（modified Barthel index,MBI)评价患者日常生活能力。在治疗前（-3~0天）、治疗后（第4周±3天）各评价一次。研究人员采用SPSS26.0统计分析软件，对研究所得结果数据进行处理分析。其中，所得计量资料数据以均数(?x)±标准差(s)的形式表示,各组组间进行比较采用独立样本t检验，而组内治疗前后结果对比则采用配对t检验;计数资料组间比较采用χ2检验;检验水准α=0.05。
动物实验：将25只大鼠随机分为对照组5只，模型组10只和头针组10只。对照组常规喂养，不做任何处置，而对模型组和头针组大鼠采用大脑中动脉栓塞方法（MACO）进行脑缺血模型造模。头针组大鼠造模24h后对其采用头穴丛刺法在大鼠百会及左右侧各旁开2mm处针刺，快速捻转1min后留针2h，每日1次，共14d；模型组大鼠造模后正常饲养，每日给予头针组相同强度及时间的抓摸刺激；对照组每日仅给予同头针组相同强度及时间的抓摸刺激。造模24h后对各组大鼠采用Zealonga评分对其神经功能损伤情况进行评价，造模24h及干预14d后对各组大鼠分别采用Narrow ally test进行行为学评价，并采用BL-420S生物机能实验系统检测各组大鼠肌张力。干预14d后，采用TTC染色测定大鼠脑梗死体积。应用石蜡切片及免疫荧光双标测定大鼠梗死区脑皮质内GABA及其受体GABAA和GABAB的表达情况，采用免疫荧光法检测三组大鼠梗死部分脑皮质中Trkb及KCC2表达，采用Western Blot检测三组大鼠梗死区脑皮质中BDNF含量及Trkb含量表达。采用SPSS26.0软件进行统计学分析，采用Graphpad Prism9.0对统计结果进行描述。
结果
1.临床研究：
临床研究结果显示：头穴丛刺结合运动疗法治疗中风后肢体痉挛可明显降低患者患侧上肢和下肢的痉挛程度，且疗效优于单独运用运动疗法（P＜0.05）；经治疗两组患者Fugl-Meyer量表评分均明显提升，头针组与对照组相比无统计学差异，但头针组评分均值仍略高于对照组（P＞0.05）；两组均可明显提升患者日常生活活动能力，且头穴丛刺联合运动疗法明显优于单独运用运动疗法（P＜0.05）。
2.动物实验:
脑梗死模型造模成功24h后，应用Zealonga评分法对大鼠进行神经功能损伤评价。对照组未出现神经功能损伤情况，模型组与头针组相较于对照组均表现明显神经功能损伤情况（P＜0.05），而模型组与头针组则无明显差异（P＞0.05）。
造模24h后对大鼠进行Narrow ally test行为学测试结果显示：与对照组相比模型组与头针组大鼠站立向脑梗死侧转身几率明显增多（P＜0.05），而模型组与头针组两组间无明显差异（P＞0.05）；干预治疗14天后，相较于对照组，模型组与头针组向脑梗死侧转身几率仍明显偏多（P＜0.05）。与模型组相比，头穴丛刺治疗显著降低了Narrow ally test行为学评分。
在大鼠造模24h及干预14d后三组进行肌张力检测结果显示：造模24h后，对照组大鼠肌张力未明显改变；与对照组相比模型组和头针组均出现肌张力明显增高（P＜0.05）；经14d治疗后，对照组及模型组肌张力较治疗前均未明显改变，头针组治疗后较其治疗前及模型组治疗后肌张力均明显减低（P＜0.05）。
干预14d后，对大鼠脑组织切片并进行TTC染色后观察结果显示：对照组大鼠脑组织未出现梗死区域，与对照组相比，模型组和头针组可见明显梗死区域（P＜0.05）。而头穴丛刺治疗后与模型组对比，头针组梗死体积显著降低（P＜0.05）。
干预14d后，免疫荧光检测各组大鼠脑皮质GABA、GABAA、GABAB中含量结果显示：与对照组比较，模型组大鼠缺血侧脑皮质中GABA表达明显减低（P＜0.05）；与模型组比较，头针组大鼠缺血侧脑皮质中GABA表达有所提高（P＜0.05），但其表达水平显著低于对照组（P＜0.05）。与对照组比较，模型组大鼠缺血侧脑皮质中GABAA表达明显减低（P＜0.05）；与模型组比较，头针组大鼠缺血侧脑皮质中GABAA表达有所提高（P＜0.05），但其表达水平仍低于对照组（P＜0.05）；与对照组比较，模型组大鼠缺血侧脑皮质中GABAB表达明显减低（P＜0.05）；与模型组比较，头针组大鼠缺血侧脑皮质中GABAB表达有所提高（P＜0.05），但其水平同样低于对照组（P＜0.05）。
干预14d后，免疫荧光法检测各组大鼠脑皮质中KCC2及Trkb表达结果显示：与对照组相比，模型组大鼠损伤侧皮质中KCC2表达明显减低（P＜0.05），而头针组大鼠经头穴丛刺治疗后KCC2表达有所提升，与模型组相比具有统计学差异（P＜0.05）;与对照组相比，模型组损伤侧皮质中Trkb表达明显减低（P＜0.05）.而经头穴丛刺治疗,与模型组对比头针组Trkb表达进一步减低，头针组与模型组相比具有统计学差异（P＜0.05）。
干预14d后，采用Western Blot检测三组大鼠梗死区脑皮质中BDNF及Trkb含量，表达结果显示：与对照组相比，模型组大鼠损伤侧皮质中BDNF表达减低，头针组大鼠经治疗后与模型组相比BDNF表达明显上调（P＜0.05）；与对照组相比模型组损伤侧皮质中Trkb表达明显减低（P＜0.05），经头穴丛刺治疗,与模型组对比头针组Trkb表达进一步减低，与模型组相比具有统计学差异（P＜0.05）。
结论：
1.临床研究结果表明，头穴丛刺联合运动疗法治疗中风后肢体痉挛可明显减低患者患侧上肢及下肢的痉挛程度，可明显提升患者的运动功能及日常生活活动能力，表明头穴丛刺治疗中风后肢体痉挛具有临床有效性。
2.头穴丛刺疗法干预缺血性脑卒中模型大鼠，可减小脑梗死体积，减低大鼠的痉挛程度，使大鼠行动能力得到提升，对损伤神经具有保护作用。
3.头穴丛刺疗法干预缺血性脑卒中模型大鼠，可上调损伤侧皮质抑制性神经递质及其受体含量表达，减低痉挛程度。
4.头穴丛刺疗法干预缺血性脑卒中模型大鼠，可调节损伤侧皮质BDNF/Trkb-KCC2信号通路表达，BDNF/Trkb-KCC2信号通路可能是头穴丛刺疗法降低大鼠痉挛状态的作用机制。
结合临床与基础两方面研究结果可得出结论：头穴丛刺疗法对中风后肢体痉挛具有明确治疗作用，其作用机制可能与调整损伤侧脑组织内神经递质有关。头穴丛刺疗法基于中医学“形神合一”理论，依据“治神调形”法则，本研究为其治疗中风后肢体痉挛提供临床及实验证据。