【摘 要】
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败血症是严重威胁小儿生命的疾病之一,目前的诊断手段包括血培养等都存在很大的不足,因此需要一种快速、敏感、准确的诊断方法.该研究主要是借鉴PCR和基因芯片技术的原理,设
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败血症是严重威胁小儿生命的疾病之一,目前的诊断手段包括血培养等都存在很大的不足,因此需要一种快速、敏感、准确的诊断方法.该研究主要是借鉴PCR和基因芯片技术的原理,设计和制作败血症病原的简易诊断芯片,并探讨在此过程中的一系列技术问题,包括探针的设计、固定、芯片的杂交条件、杂交信号的检测以及待检标本中靶基因的扩增.我们以10种引起败血症最常见的细菌为实验材料.芯片检测的靶基因是16SrRNA基因,利用它的保守性设计通用引物,利用它的特异性设计各菌种的特异性探针.共设计了13个探针,通过加尾和加热固定制成简易芯片后和10个菌种的16SrRNA基因扩增产物杂交,实验过程中确定最优化的杂交条件.该研究证实了PCR结合基因芯片检测病原菌方法的可行性.PCR扩增技术使该方法的敏感性大大高于血培养.芯片的技术特点确保检测的特异性.因此我们认为PCR结合基因芯片技术在败血症病原检测中是一种有前途的方法.
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