妊娠期母猪不同维生素D3水平对子代肌肉发育与肉品质特性的影响研究

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肌肉组织的生长与发育是衡量猪肉品质的重要指标之一。为了探究妊娠期母猪不同维生素D3水平对子代肌肉发育、肉品质特性的影响及其分子机制,本研究拟饲喂不同维生素D3水平的27头经产妊娠母猪(妊娠41天;正常组(ND):800 IU;试验组(LD、HD):200 IU、3,200 IU;每组9头)的36头子代猪(性别平衡)为研究对象,用于分析妊娠期母猪不同维生素D3水平对子代猪的肌肉发育关键基因表达与肉品质特性的影响。同时建立体外成肌分化模型,以C2C12细胞为研究对象,设1个对照组(2%马血清、0 n M维生素D3)与5个试验组(在对照组的基础上分别添加50、100、200、400、800 n M维生素D3),通过C2C12细胞成肌诱导过程中MyoD1和MYH10蛋白的鉴定和成肌关键基因的表达分析,筛选了C2C12细胞成肌诱导中的最佳维生素D3浓度,联合分析验证了维生素D3在子代猪肌肉生长发育过程中的功能和机理。结果如下:1.不同浓度维生素D3对小鼠C2C12细胞成肌调控的分子机理研究表明:形态学与免疫荧光鉴定的结果显示:诱导6天和12天后的小鼠C2C12细胞在400n M浓度的维生素D3水平较对照组和其它试验组有较多清晰、平行分布的多核肌管,且分别出现MyoD1和MYH10阳性表达。RT-PCR结果显示:400 n M维生素D3处理组C2C12细胞MyoG、MyoD1、Myf5、Myh6、Myh7、Myh8、IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR、CAST mRNA表达水平显著高于对照组和其它试验组(P<0.05),与对照组相比,50、100、200、800 n M维生素D3处理组C2C12细胞Myh7、IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR、CAST mRNA表达水平显著升高(P<0.05),而MSTN mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。提示维生素D3浓度增加到400 n M时,可刺激成肌相关基因的表达,减弱肌肉生长抑制素的表达,但维生素D3浓度的增加至800 n M时的效果减弱,表明小鼠C2C12细胞成肌相关基因表达对维生素D3具有浓度依赖性变化。2.母体不同维生素D3水平对子代猪背最长肌肌肉发育关键基因的影响研究表明:与ND组子猪相比,HD组子代猪背最长肌中MyoD1、CAST、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR、My HCⅡa、My HCⅡx mRNA表达及MyoD1的蛋白表达水平显著升高(P<0.05),LD组子猪则表现为显著降低(P<0.05),值得注意的是,HD组和LD组子猪背最长肌中MSTN、IGF-ⅠR、My HCⅡb mRNA表达均显著降低(P<0.05)。与LD组相比,ND组和HD组背最长肌中TypeⅠ所占比例显著降低(P<0.05),而TypeⅡ所占比例则显著升高(P<0.05)。以上结果表明,母体高浓度维生素D3水平影响了子代猪的肌肉发育相关基因及蛋白的表达,进而提升了子代猪的肉品质。3.不同维生素D3水平对子代猪肉品质的影响研究表明:与LD组相比,HD组子代猪背最长肌的pH、a*值、硬度、凝聚力、弹性、咀嚼性和储能模量(G’)值显著提高(P<0.05),而剪切力、蒸煮损失、L*值、T21和T22弛豫时间显著降低(P<0.05)。此外,冷藏时间显著增加了LD组和ND组的蒸煮损失、b*值、TPA参数、T22弛豫时间和所有试验组的G’值,而显著降低了LD和ND组的a*和L*值(P<0.05)。以上结果表明,母体高浓度维生素D3水平影响了子代猪的冷藏猪肉糜的感官指标,从而提高了宰后冷藏期间的品质属性。综上所述,本研究表明母体妊娠期高水平维生素D3通过调节子代肌肉发育相关基因与蛋白表达改善了肉品质特性,从而为通过猪早期营养(维生素D3)调控改善子代猪肉品质特性提供科学依据与生产实施方案。
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