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琼脂糖是一种多孔的壳聚糖,琼脂糖玻片具有立体空间结构,为生物反应提供了良好的反应空间,具有成本低、固定时间短、操作简便等优点。利用琼脂糖的固定优势,探讨琼脂糖涂层玻片在蛋白芯片中的应用。
通过间接竞争的多组分免疫分析,利用蛋白芯片的方法对磺胺二甲嘧啶、链霉素、泰乐霉素等三种兽药残留物同时检测。首先,将这三种兽药残留物分别与小牛血清蛋白(BSA)偶联,以获得这些残留物的完全抗原。再将这三种偶联物固定在经过氧化的琼脂糖玻片上,偶联物和标准品与其特异性抗体竞争反应后,再与其Cy5标记的特异性二抗反应,通过标记二抗的诱导发光的荧光值来检测这三种兽药残留物。实验确定了这三种兽药残留物同时定量检测的线性范围及其各自的检测极限和CV。其中,磺胺二甲嘧啶、链霉素和泰勒霉素等三种兽药残留抗生素检测的线性范围分别是3.26μg/L~53.2μg/L,2.01μg/L~26.4μg/L,6.37μg/L~36.5μg/L,它们的检测极限分别是3.261μg/L,2.01μg/L,和6.37μg/L。点间CV都在10%以内,孔间CV都在15%以内。