【摘 要】
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ADF4是拟南芥肌动蛋白结合蛋白(ADF/cofilin)家族中的一员,到目前还未见到拟南芥ADF4的功能的报道,该研究利用拟南芥AtADF4基因在烟草中表达来探讨AtADF4的功能.该论文主要包
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ADF4是拟南芥肌动蛋白结合蛋白(ADF/cofilin)家族中的一员,到目前还未见到拟南芥ADF4的功能的报道,该研究利用拟南芥AtADF4基因在烟草中表达来探讨AtADF4的功能.该论文主要包括以下内容:拟南芥AtADF4基因的克隆、pBADF4植物表达载体的构建、转基因植株的分子检测、ADF4对T<,1>烟草生长发育的影响的形态观察.研究结果如下:1.采用PCR技术,从拟南芥基因组DNA中分离克隆肌动蛋白解聚因子AtADF4,并进行了序列分析.与AtADF4 mRNA比较,AtADF4 DNA在251-341bp有一长91bp 的内含子.编码区核苷酸序列和推导的氨基酸序列与报道的同源性为100﹪.表明克隆的片段为拟南芥AtADF4基因.2.利用克隆到的拟南芥AtADF4和植物表达载体pBI121,成功构建了植物表达载体pBADF4.3.通过农杆菌介导的遗传转化体系将AtADF4导入烟草,PCR检测证明拟南芥AtADF4已整合到烟草基因组中.RT-PCR检测表明在7株转基因植物AtADF4已经表达.4.ADF4对T<,1>烟草生长发育的影响:(1)转基因T<,1>代植株下胚轴在暗培养及光照培养条件下均比对照表现出不同程度的弯曲,暗培养条件下下胚轴弯曲程度较强.(2)T<,1>代烟草根毛稀少,并且根毛弯曲;而对照根毛密集且根毛直.(3)T<,1>代烟草下胚轴薄壁细胞壁比对照大,维管束排列不整齐.(4)T<,1>代烟草叶下表皮保卫细胞气孔开度比对照的小.(5)T<,1>代烟草开花时间比对照平均延迟了7-8天.(6)T<,1>代烟草花粉管比对照粗短.
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