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背景和目的:胰腺癌是一种病死率极高的消化系统恶性肿瘤。侵袭转移是胰腺癌的常见现象与局部复发和疼痛有着重要联系。一氧化氮(NO)可调控胰腺癌细胞的生长及侵袭等生物学行为,在维持胰腺癌的恶性生物学行为起到重要作用。NO可上调癌细胞自噬水平为侵袭转移供应能量。神经浸润(PNI)是胰腺癌侵袭转移的主要方式,也是胰腺癌转移的特殊通道。研究目的:(1)观察NO相关蛋白在胰腺癌中的表达及其临床意义,探讨NO相关蛋白与胰腺癌侵袭转移尤其是神经浸润(PNI)的相关性;(2)观察NO供体对胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能的分子机制。方法:(1)免疫组织化学染色技术检测E-cadherin、iNOS、NQO1及LC-3在胰腺癌组织中的表达,分析其与胰腺癌临床病理特征及PNI之间的相关性。(2)用MTT方法检测不同浓度DETA/NO对胰腺癌细胞株增殖的影响。(3)通过细胞划痕实验及Transwell侵袭实验检测DETA/NO对胰腺癌细胞株迁移及侵袭能力的影响。(4)应用Real-time PCR技术检测DETA/NO干预胰腺癌细胞株后其侵袭相关蛋白mRNA水平的变化。(5)Western blot检测DETA/NO对胰腺癌细胞株自噬相关蛋白表达变化的影响。结果:(1)E-cadherin、iNOS、NQO1、及LC-3在胰腺癌组织中表达率分别是68.9%、63.9%、55.7%、57.4%,E-cadherin表达与LC-3具有相关性,LC-3与胰腺癌局部浸润发生具有相关性,E-cadherin、LC-3表达与胰腺癌神经浸润具有显著相关性。(2)不同浓度DETA/NO对胰腺癌细胞株增殖影响有差异,低浓度促进癌细胞增殖水平,高浓度抑制增殖。(3)低浓度DETA/NO对胰腺癌细胞株进行干预,可促进胰腺癌细胞株迁移及侵袭能力。(4)50μM浓度的DETA/NO干预Bx Pc-3细胞株可上调相关基因iNOS、TNF、MMP-2、MMP-9的mRNA水平,其中MMP-2的mRNA水平显著增高;(5)用100 uM的DETA/NO干预1h后,LC-3表达水平即开始升高,而随干预时间延长至8小时即又降至接近正常,而NQO1和Beclin 1无明显差异。结论:NO代谢相关蛋白的表达与胰腺癌恶性生物学特性密切相关,在胰腺癌进展中可能扮演重要角色。低浓度NO促使胰腺癌细胞迁移侵袭能力增强,可能与胰腺癌神经浸润发生相关;NO上调侵袭相关蛋白表达水平可能是改变胰腺癌细胞侵袭能力的分子机制;NO对细胞自噬蛋白表达水平的影响可能与癌细胞维持增殖活性及侵袭能力有关。本研究可为NO代谢途径导致胰腺癌神经浸润研究提供前期基础。