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目的: 探讨γ-干扰素对实验性兔肝纤维化的保护作用及相关机制,研究实时剪切波弹性成像用于评估γ-干扰素干预兔肝纤维化疗效的可行性及准确性。 方法: 随机将52只大白兔分为肝纤维化造模组46只,正常对照组6只。肝纤维化造模组:实验前两周每周一、周五给予剂量比为 1:1 的四氯化碳和橄榄油混合制剂按0.3ml/kg经皮注射;两周后将注射剂量改成0.2ml/kg;第8周末从造模组中随机抽取 4 只大白兔处死,并行病理学检查,观察肝脏组织病理变化及肝纤维化病理分期,随后从造模组中随机抽取 32 只大白兔随机分为γ-干扰素干预组(24只)、肝纤维化模型组(8只);γ-干扰素干预组分为A组(大剂量组)、B组(中剂量组)、C组(小剂量组)每组8只,分别给A、B、C组每只大白兔每天皮下注射γ-干扰素15万Iu/kg、 5.5万Iu/kg、2.0万Iu/kg,并继续每周一、周五给予剂量比为 1:1 的四氯化碳和橄榄油混合制剂按 0.2ml/kg经皮注射。正常对照组:前两周每周一、周五给予生理盐水0.3ml/kg经皮注射;随后每周一、周五将注射剂量改成0.2ml/kg。实验周期至12周后将实验组和正常对照组全部禁食8h后,采集耳中动脉血4ml,离心后送至检验科检测血清肝功能及肝纤维化四项指标,随后将正常对照组、肝纤维化模型组、γ-干扰素干预组大白兔固定好后对肝脏行灰阶超声检查,并行实时剪切波弹性成像测肝中叶Emean值。而后对大白兔进行麻醉镇静,开腹观察肝脏外形、体积、颜色等,并取肝中叶组织行 HE 及免疫组化组织病理学检查,对比各组的病理变化及α-SMA表达水平变化,对比分析γ-干扰素干预组与正常对照组及肝纤维化模型组的肝纤维化分期及肝脏Emean值差异。 结果: 1.造模前,正常对照组、肝纤维化模型组、γ-干扰素干预组的大白兔体重较一致(P>0.05)。第12周结束时正常对照组大白兔全部存活,状态良好,体重增加,灰阶超声显示正常对照组肝脏实质回声均匀,包膜光整,下缘锐利,无腹水形成,大体标本显示肝脏大小正常,颜色鲜红,肝包膜光滑,均为S0期。肝纤维化模型组大白兔状态差,体重减轻,灰阶超声显示肝实质回声增粗、增强,包膜钝,可见腹水及结节形成,大体标本显示肝脏体积变小,颜色暗红,被膜增厚,肝纤维化分期均为S3、S4期。γ-干扰素干预组大白兔状态相较肝纤维化模型组有所改善,活动量增加,第12周结束时体重大于肝纤维化模型组,但小于正常对照组(P<0.01),灰阶超声显示肝脏实质回声细密、稍增强,包膜尚光滑,下缘稍顿,无腹水形成,大体标本显示肝脏体积肿大,呈橙黄色,包膜尚光滑,肝纤维化分期大部分处于S1、S2期。 2. γ-干扰素干预组中肝脏 Emean 值与血清肝纤维化四项指标均高于正常对造组,但低于肝纤维化模型组(P<0.01),γ-干扰素干预组的肝脏 Emean值与肝纤维化病理分期呈高度线性相关 (r=0.935,P=0.000)。 3.病理示:正常对照组肝小叶结构正常,免疫组织化示无胶原纤维增生,仅少量棕黄色α-SMA表达于汇管区内血管及胆管壁。肝纤维化模型组肝细胞分布杂乱、变性坏死,免疫组化显示肝小叶内有胶原纤维增生,门管区及周围棕黄色α-SMA大量表达。γ-干扰素干预组肝细胞少量碎屑状坏死,肝小叶组织结构轻度破坏,肝窦内可见少量网状纤维,汇管区及周围棕黄色α-SMA表达量低于肝纤维化模型组(P<0.01)。 结论: 1.γ-干扰素可在大白兔肝纤维化模型中通过抑制肝星状细胞的活化、增殖,进而减少ECM合成以及α-SMA的表达,达到逆转和缓解肝纤维化。 2. Emean 值与血清肝纤维化四项指标均能评估 γ-干扰素干预后的肝纤维化分期,但Emean值的诊断性指标均优于血清肝纤维化四项指标,且Emean值可对肝纤维化分期予以量化评估,能够更客观、敏感的评价γ-干扰素干预后的肝纤维化程度从而反应γ-干扰素的疗效。