白背三七的体内降血糖作用及其对小鼠AKT/PI3K信号通路的影响

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本实验采用真空冷冻干燥技术,将新鲜洁净的白背三七茎叶直接制成冻干粉末。运用苯酚-硫酸法和亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法分别测定冻干粉中粗多糖含量和总黄酮含量。本实验对构建糖尿病小鼠模型进行了优化,通过高脂高糖饲料添食联合STZ注射诱导糖尿病模型。把成模小鼠随机分为糖尿病模型组,低、中、高剂量(分别含有1.2%、2.4%、4.8%冻干粉的饲料)白背三七添食组,连续添食4周,其中正常对照组和模型组饲喂普通饲料,每周测定和记录各组小鼠血糖和体重变化,最后眼球取血、取肝脏和胰脏。实验结果显示:冻干粉中粗多糖含量为26.69±0.53 mg/g,总黄酮含量为33.59±2.64mg/g。高脂高糖添食加STZ注射诱导的糖尿病小鼠,成模率高,死亡率低,小鼠血糖明显上升,糖尿病小鼠空腹血糖均维持在20-25mmol/L之间,与正常对照组小鼠有显著差异(P<0.01)。白背三七冻干粉添食4周后,各剂量的添食组都可以有效降低高脂高糖饲料添食联合STZ注射联合诱导的糖尿病小鼠的空腹血糖;肝脏中GSH-PX、SOD水平升高,MDA含量降低,表明其可以增强小鼠的抗氧化能力;并降低小鼠胰岛素水平,减轻糖尿病小鼠的胰岛素抵抗;调节肝糖原代谢。为了进一步研究白背三七冻干粉降血糖作用的机理,本实验应用实时荧光定量RCR技术和Western blot蛋白检测方法,检测胰脏组织中AKT、PI3K和PDK-1基因的变化和AKT、P-AKT、PI3K和PDK-1蛋白的表达情况。结果表明,AKT、PI3K和PDK-1基因表达显著上升,具有统计学意义(P<0.05),且成剂量效应;AKT、P-AKT、PI3K和PDK-1蛋白表达结果与m RNA表达一致,可以推测白背三七的降血糖作用是通过激活AKT/PI3K信号通路,改善胰岛素抵抗,从而调节胰岛素的分泌,促进胰岛细胞正常分泌胰岛素功能的恢复。因此,本实验结果充分证明了白背三七对糖尿病小鼠的降血糖功能及其作用机理,对白背三七的实用化开发提供了重要的科学依据。
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