粘细菌的生物学特性及活性物质筛选

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该实验以云南、河北、四川等不同地区的土壤和一些食草性动物粪便为分离样品,使用该实验室建立的一套分离纯化流程得到21株嗜菌性粘细菌的纯培养物,并对其子实体形态、营养细胞和粘孢子形态、液体培养特征作了描述.同时对溶纤维素群粘细菌的分离纯化方法进行了初步研究,获得6株分离物,显微摄影记录其子实体形态.该实验在分离纯化的前期工作基础上对粘球菌属(Myxococcus)的四个菌株91002、92065、92076、91086以及孢囊杆菌属(Cystobacte)的两个菌株9401 3和93009在液体培养中的的营养要求以及生长特性作进一步研究.研究发现,VY/2、PY、CYG2培养基均适合大部分菌株的生长.并以VY/2培养基为基础培养基,用正交试验和方差分析的方法确定每种成分的最佳含量,得到了适合粘球菌属(Myxococcus)生长的最优培养基配方.粘细菌的生长周期较长,在合适的培养条件下,接种后5-7天是其生长稳定期.对于部分分散生长的粘细菌菌株(以91002为例),用测OD值和测生物量两种方法绘制的生长曲线是基本一致的.选择不同的碳氮源对粘细菌的生长影响很大.粘球菌属的大多数菌株不能有效的利用单糖和双糖类化合物.活性干酵母、大豆蛋白胨以及复杂有机氮源黄豆粉是粘细菌生长的良好氮源.采用抑菌圈法测定菌株93009和92076在不同培养基中的抑菌活性.活性分析结果表明,菌株93009对真菌特别是毛霉的生长有抑制作用,菌株92076能延缓黄曲霉孢子的形成.此外,培养基成分和培养时间对抑菌活性也有一定的影响.该实验分别采用有机溶剂萃取法和树脂吸附法处理实验菌株的发酵液,得到的活性物质粗提液作为检测样品.筛选结果为:菌株92034和92076的次级代谢产物对谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)具有抑制作用,抑制活性高达70﹪以上;菌株92112的发酵产物对TE13(食管癌)和K562(白血病)肿瘤细胞系有较高的抑制活性;菌株92034和91085具有较高的乙酰胆碱酯酶抑制剂活性.
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