论文部分内容阅读
目的:本实验通过建立猪腹部肠管火器伤模型,观察伤后大脑结构和功能的变化,伤后血浆内毒素、TNF-α、IL-6水平、脑组织COX-2、PGE2的表达及脑细胞凋亡的动态变化,探讨COX-2等因子在腹部肠管火器伤后继发性脑损伤中的作用,旨在为腹部火器伤后继发性脑损伤的预防和治疗提供理论和实验依据。方法:采用健康长白仔猪42头,随机等分为7组:对照组和腹部肠管火器伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h实验组。实验组在常温常湿环境下(温度22℃-24℃,相对湿度50%-60%)麻醉后军用54式手枪枪击致伤(射击点为脐水平后方2cm处右侧腹壁皱襞下缘无毛区),建立腹部肠管火器伤模型。对照组除不致伤外,其余步骤与实验组相同。各实验组于伤后相应时间点取材,对照组回实验室立即取材。在光镜及电镜下观察各组脑组织学变化,采用显色基质鲎试剂法检测各组血浆内毒素水平;双抗体夹心ELISA法测各组血浆TNF-α、IL-6水平及脑组织中的PGE2表达;采用Tunnel法测定脑细胞凋亡指数;免疫组织化学图像分析法测定各组脑组织COX-2的表达。结果:(1)对照组及1h、2h、4h、8h组脑组织未见明显的损伤性变化。12h、24h组脑组织于光镜下可见神经细胞层次不清、排列紊乱,细胞出现不同程度水肿,毛细血管扩张、腔内红细胞崩解,管腔周围出现较大间隙,间质疏松,呈网状改变。(2)电镜下对照组及1h、2h、4h组的神经细胞结构完整,神经细胞核核膜规则、完整,胶质细胞无肿胀,毛细血管周围无空泡变性,内质网、核糖体分布密集,线粒体内峙规则;8h、12h、24h细胞轮廓模糊,间隙增大,细胞膜结构部分缺失,细胞质呈空洞状态,粗面内质网扩张;高尔基体肿胀,器池及囊泡消失。线粒体肿胀、扩张及空泡样变,突触结构肿胀变性;细胞核染色质凝集于核边缘,核膜部分溶解,胶质细胞肿胀加重,毛细血管管壁扩张,管腔狭窄,血管周围呈空腔状态溶酶体明显增多,微管扭曲,可见微丝溶解。(3)实验各组血浆内毒素水平均明显高于对照组(P<0.05),于伤后8h出现高峰,伤后12h仍维持在高峰值水平。(4)实验各组血浆TNF-α、IL-6水平均明显高于对照组(P<0.05),均于伤后12h出现高峰。(5)伤后各组脑细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),且随时间延长而增加。(6)实验组各组脑组织COX-2的表达均明显高于对照组(P<0.05),且与损伤时间的长短成正相关。(7)实验组各组脑组织PGE2的表达均明显高于对照组(P<0.05),且与损伤时间的长短成正相关。(8)相关分析表明,伤后血浆内毒素水平与血浆TNF-α、IL-6水平、脑组织COX-2、PGE2的表达及脑细胞的凋亡均呈正相关,相关系数分别为0.908、0.911、0.548、0.716、0.892 (P<0.05)。结论:(1)腹部肠管火器伤导致大脑出现结构和功能的损伤性变化,随着伤后时间的延长而加重。(2)腹部肠管火器伤后内毒素血症可刺激刺机体TNF-α、IL-6的产生、刺激脑组织COX-2、PGE2的表达以及脑细胞的凋亡,并通过这些炎症因子介导脑损伤。复杂的内毒素-细胞因子网络在促进腹部肠管火器伤后继发性脑损伤的发生和发展中具有重要作用。