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【目的】骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)是累及多能造血干细胞的克隆性疾病,患者的骨髓造血干/祖细胞在增殖和分化过程中存在过度凋亡.其机制目前尚未完全明了,而某些细胞因子可抑制体外培养的MDS造血前体细胞的凋亡.Bcl-2和Bcl-xL是一组抑制造血细胞凋亡的膜相关蛋白,参与造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)长期生存的维持;Caspase-3又称半胱氨酸蛋白酶32(cysteine protease P32,CPP32),是白介素-1β转化酶(interleukin-1β-converting enzyme,ICE)家族的一员,其高表达可引起细胞的凋亡.白细胞介素-15(interleukin-15,IL-15)是一种重要的骨髓生长调节因子,可延迟或抑制多种细胞的凋亡,其机制之一可能是通过增强Bcl-2、Bcl-xL基因的表达和降低caspase-3 mRNA的表达.为此,我们用定量分析观察其对体外培养的MDS造血前体细胞凋亡状况及其对MDS骨髓造血白细胞分化抗原群34+(leucocyte clusterof differentiation antigen34+,CD34<+>)干/祖细胞Bcl-2、Bcl-xL和caspase-3 mRNA表达的影响,为进一步探索MDS发病机制及治疗提供理论依据.【方法】1按文献[1]确诊的MDS患者18例,按世界卫生组织(Wold Health Orgnisition,WHO)新的MDS分型[2].抽取骨髓,然后分离CD34+细胞,分离的细胞经流式细胞仪鉴定其纯度.2用细胞计数、噻唑蓝(Thiazolyl blue,MTT)抑制试验,体外培养12天,找出IL-15作用的峰浓度,了解细胞最佳增殖时间.3采用流式细胞仪分析(flow cytomeutry,FCM)和荧光显微镜观察细胞核形态检测两种方法同时检测体外培养的MDS造血前体细胞增殖及分化过程中的凋亡状况,观察IL-15对它们的影响,并进行定量分析.4采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Bcl-2、Bcl-xL和caspase-3 mRNA表达水平,观察不同时间、不同浓度的IL-15对它们的影响.【结论】1从MDS骨髓标本中提取的CD34<+>造血干/祖细胞,其细胞回收率、富集率及回收后CD34<+>细胞纯度均达到理想水平.2在一定的时间和浓度内,IL-15可呈时间和剂量依赖性的促进MDS骨髓CD34<+>造血干/祖细胞增殖.3 IL-15可部分抑制体外培养的MDS造血前体细胞凋亡.4抑制凋亡的机制之一可能是增强Bcl-2、Bcl-xL基因mRNA的表达,同时下调其caspase-3基因mRNA的表达(在一定的时间和浓度内).