含马齿苋、青刺果油、透明质酸复合剂对特应性皮炎作用的实验和临床研究

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目的:(1)明确含有马齿苋、青刺果油及透明质酸的复合剂治疗BALB/c小鼠AD模型的疗效;(2)探讨透明质酸修护生物膜在干燥性湿疹序贯疗法中的疗效。方法:(1)动物实验:以二硝基录苯(DNCB)和4-乙氧基亚甲基-2-苯基恶唑啉(OX)分别溶于丙酮配制成1%的抗原溶液经皮诱导BALB/c小鼠耳朵建立AD模型。将小鼠分为A正常组、B丙酮组、C造模组、D基质组、E基质+透明质酸、F基质+透明质酸+马齿苋组、G基质+透明质酸+青刺果油组、H基质+透明质酸+马齿苋+青刺果油组。D、E、F、G及H组在模型建立2周后开始治疗,连续治疗4周,分别于治疗前、治疗1周、2周、3周、4周后每组处死小鼠各3只,观察治疗前后皮损变化情况、鼠耳肿胀度、血清IgE、皮损组织病理、基因蛋白芯片技术检测炎症因子IL-4、IL-5、IL-13及IL-12、IFN-r的变化、电镜观察板层小体数量变化,并行免疫组化观察CK6、CK10、CK14、Filaggrin、Loricrin表达的变化、采用德国CK皮肤弹性测试仪进行皮损无创性皮肤生理功能测试。(2)临床实验:多中心、随机、开放对照序贯疗法研究透明质酸修护生物膜在干燥性湿疹中的的疗效。82例分为试验组和对照组。试验组外搽糠酸莫米松乳膏和透明质酸修护生物膜,对照组仅外搽糠酸莫米松乳膏,每天2次,14d后停用糠酸莫米松乳膏,试验组继续外搽透明质酸修护生物膜,分别于首诊、治疗第7d、14d、28d、42d、56d随访。比较两组皮损SCORAD评分、总改善率、受试者自评、复发率、经皮水分丢失(TEWL)值及角质层含水量。结果:(1)动物实验:通过鼠耳皮损变化、肿胀度、皮损组织病理学检查,血清IgE检测及炎性因子表达提示模型建立成功。治疗组较模型组皮损红斑明显变淡,无鳞屑及结痂;E、F、G、H治疗组鼠耳肿胀度较模型组明显变薄,H组降低明显(P<0.05);H组IgE浓度较模型组明显较低(P<0.01);蛋白芯片技术检测结果示E、F、G、H组细胞炎症因子IL-4、IL-5、IL-13浓度降低(P<0.05),IL-12、IFN-r表达升高,H组明显;电镜观察示H治疗组小鼠表皮颗粒层板层小体数目较模型组增加,但较正常对照组仍略减少;免疫组化染色结果显示H治疗组较模型组,CK10表达增强;而CK6、K14表达降低;Fliaggrin、Loricrin表达增强,尤以H组明显;无创性皮肤生理功能测试结果示:治疗E、F、G、H组角质层含水量比模型组明显升高,尤以H组升高明显(P<0.05),E、F、G、H组TEWL值较模型组明显降低,H组降低明显,接近于正常对照组(P<0.05)。(2)临床实验:(1)试验组比对照组皮损SCORAD评分显著改善,观察到42d时SCORAD评分,试验组(4.42±2.64)、对照组(6.03±4.02),56天时试验组(3.49±2.78),对照组(6.06±4.28),两组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);(2)试验组改善率高于对照组,停用糠酸莫米松乳膏后,试验观察56d时,差异均有统计学意义(P<0.05);(3)停用糠酸莫米松乳膏后,观察到28、42、56d时试验组均无复发,对照组复发率分别为11.4%、11.4%、20%,两组比较,差异有统计学意义(P均<0.05):(4)试验组TEWL下降低于对照组,56d时,试验组TEWL(10.35±2.02)与对照组TEWL(17.28±4.06)比较,差异有统计学意义(P<0.05);试验组角质层含水量高于对照组,42d时试验组角质层含水量(29.10±5.39)、对照组(23.12±4.76),56d时,试验组角质层含水量(31.79±4.09)、对照组(22.87±4.85),两组比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。试验组未发生不良反应。结论:(1)动物实验:DNCB和OX经皮致敏BALB/c小鼠可成功建立特应性皮炎动物模型。含有马齿苋、青刺果油及透明质酸的复合剂可明显抑制BALB/c小鼠AD模型的炎症反应并恢复其皮肤屏障功能,为特应性皮炎提供了一种新的治疗方法。(2)临床实验:透明质酸修护生物膜可以辅助治疗干燥性湿疹,降低复发率,促进皮肤屏障功能的恢复,且安全性高。
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