3-溴丙酮酸联合肝动脉栓塞术治疗兔VX2肝癌的实验研究

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目的:探究3-溴丙酮酸(3-BrPA)联合肝动脉栓塞术抑制兔VX2肝癌生长的安全性及有效性材料及方法:CT引导下经皮穿刺实验兔肝脏左叶,注射VX2组织悬液,2周后进行增强CT检查确认建立兔VX2肝癌模型成功。将实验兔随机分成A、B、C、D四组,每组6只。A组:对照组(经肝动脉灌注10mM磷酸盐缓冲溶液25mL);B组:单纯动脉灌注组(经肝动脉灌注1.75mM的3-BrPA溶液25mL);C组:单纯肝动脉栓塞组(经肝动脉用直径为100-300μm的Embosphere微球进行栓塞);D组:联合组(经肝动脉灌注1.75mM的3-BrPA溶液25mL,后再用直径为100-300μm的Embosphere微球进行栓塞)。所有实验兔在治疗前以及处理后的1、3、7天分别抽静脉血行肝功能监测(谷丙转氨酶、谷草转氨酶),并在第7天接受增强CT扫描,评估肿瘤坏死情况(mRECIST标准);CT扫描结束后,处死实验兔,取出肿瘤组织,行HE染色观察及原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测,计算肿瘤组织的凋亡率。结果:实验兔肝脏VX2肝癌模型成功率达90.3%(28/31),其中有26只完成了完整的实验操作,技术成功率为92.9%(26/28),治疗后有两只实验兔死亡,最后完成实验观察的有24只,存活率为92.3%(24/26)。术后1-3天C、D两组实验兔出现了不同程度的恶心、呕吐、嗜睡等症状,但这些症状在第四天缓解。A组与B组术后肝功能指标在不同时间点的变化无统计学差异(ALT:Pa=0.441,Pb=0.204;AST:Pa=0.978,Pb=0.801),且两组间比较无统计学差异(ALT:P=0.999;AST:P=0.998);C组与D组术后肝功能指标先升高,后降至正常水平,两组肝功能指标随时间的变化具有统计学意义差异(ALT、AST:Pc/d=0.001),但是两组间比较时变化趋势无统计学差异(ALT:P=0.981;AST:P=0.266)。各组间肿瘤反应的影像学评估差异存在统计学意义,A组所有的实验兔均表现为肿瘤进展(PD),B、C、D四组的肿瘤控制率逐渐提升,其中C组表现为完全缓解(CR)的有2只(33.3%),而D组表现为CR的有4只(66.7%)。HE染色检查中,观察到肿瘤细胞成团生长,伴有大量嗜酸性粒细胞、巨噬细胞浸润,可见坏死灶存在,且C、D两组的坏死率要明显高于A、B两组。在TUNEL检测中,A、B、C和D组凋亡率分别为26.5%±5.0%、52.0%±5.3%、77.6%±3.7%、89.7%±4.6%,4组间肿瘤组织凋亡率的差异存在统计学意义(F=214.3,P<0.001),两两比较的结果显示,B组的52.0%±5.3%的凋亡率要明显高于A组的26.5%±5.0%(P<0.001),D 组 89.7%±4.6%的凋亡率要明显高于 B 组的 52.0%±5.3%与 C 组的 77.6%±3.7%(P<0.001)。结论:3-溴丙酮酸能够抑制兔肝脏VX2肿瘤的生长,联合肝动脉栓塞术能够明显增加抗肿瘤作用,不会加重对肝功能的损伤。利用糖酵解抑制剂联合血管内治疗肝癌的新策略有待于进一步研究。
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