HIF-1a基因沉默对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响

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目的:在体观察缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)基因沉默对人肺腺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤的抑瘤效应和survivin表达的影响,旨在进一步研究HIF-1α对survivin的表达调控作用。方法:将实验用肺腺癌A549细胞分为对照组、无意义序列转染组(转染无意义对照质粒)和HIF-1α MiRNA组(稳定转染pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA HIF-1α的真核表达载体),接种裸鼠,每组8只,建立裸鼠皮下肺癌移植瘤模型,观察各组裸鼠成瘤情况,定期测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线图;观察各组裸鼠移植瘤生长情况,58天后脱颈处死所有裸鼠,瘤体称重,计算抑瘤率;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1α和survivin mRNA在移植瘤中的表达;采用免疫组化法和western-blot法检测HIF-1α和survivin蛋白在裸鼠移植瘤中的表达;采用原位末端标记(TUNEL)法检测移植瘤组织中的细胞凋亡。结果:1.裸鼠成瘤率100%,对照组和无意义序列转染组在皮下摸到小结节多集中于接种后4-5天,HIF-1α MiRNA组多集中于接种后6-7天,10天后各组均达到成瘤标准(50mm3),25天后HIF-1α MiRNA组裸鼠移植瘤的体积较对照组、无意义序列转染组明显减小(P均<0.05),34天后HIF-1α MiRNA组裸鼠移植瘤的体积较对照组和无意义序列转染组显著减小(P均<0.01),接种58d后处死所有裸鼠,HIF-1α MiRNA组移植瘤重量为(1.14±0.08)g,明显轻于对照组[(1.75±0.26)g]和无意义序列转染组[(1.71±0.18)g,P均<0.01];2. HIF-1α MiRNA组移植瘤组织中HIF-1α mRNA的相对表达量为0.10±0.01,均明显低于对照组(0.72±0.04)和无意义序列转染组(0.74±0.03)(P均<0.05);3. HIF-1α MiRNA组移植瘤组织中HIF-1α蛋白的相对表达量分别为(20.13±3.15)%和0.53±0.09,均明显低于对照组[(66.55±3.55)%和1.64±0.19]和无意义序列转染组[(69.05±5.32)%和1.76±0.09](P均<0.05);4.HIF-1α MiRNA组移植瘤组织中survivin蛋白的相对表达量分别为(22.18±3.12)%和0.50±0.06,均明显低于对照组[(69.05±5.32)%和1.07±0.08]和无意义序列转染组[(68.53±4.10)%和1.02±0.09](P均<0.05);5. HIF-1α MiRNA组移植瘤组织中凋亡细胞的数量(22.52±2.81)%显著高于对照组(11.10±0.55)%和无意义序列转染组(12.27±0.65)%,(P<均0.01).结论:1. HIF-1α MiRNA可显著抑制肺腺癌裸鼠移植瘤生长,增加肿瘤细胞凋亡;2. HIF-1α MiRNA导致HIF-1αmRNA和蛋白表达减少的同时survivin mRNA和蛋白表达也减少,提示HIF-1αMiRNA干扰通过下调survivin的表达增加肿瘤细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长的作用;
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