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本研究应用pcDNA3.1(-)CMVe·Egr-1yCDglyTK质粒表达载体,进行鼻咽癌基因-放射治疗实验研究,以进一步明确yCDglyTK融合自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤作用及其放射增敏特性。文中采用电转方法将融合自杀基因质粒表达载体转染人鼻咽癌CNE-2细胞系,用RT-PCR、Western-blot杂交方法鉴定yCDglyTK融合自杀基因在CNE-2细胞内的表达;用MTT法、克隆形成实验检测自杀基因前药系统对yCDglyTK阳性CNE-2细胞的杀伤效应及旁杀效应;应用免疫组化检测yCDglyTK阳性CNE-2细胞放射前后自杀基因蛋白表达水平的变化;用高效液相色谱法测定yCDglyTK阳性CNE-2细胞放射处理前后前体药物5-FC向5-FU的转化效率;用MTT法、克隆形成实验测定自杀基因前药系统联合放射对yCDglyTK阳性CNE-2细胞的协同杀伤作用,并用多靶单击模型拟合数据,计算在一定浓度前药存在时该融合自杀基因前药系统对CNE-2细胞的放射增敏指数;用yCDglyTK自杀基因阳性CNE-2细胞移植Balb/C裸鼠进行体内基因-放射治疗研究;并比较了脂质体、磷酸钙纳米粒介导和裸DNA三种不同转染方法对yCDglyTK融合自杀基因质粒表达载体转染CNE-2细胞的转染效率,对该自杀基因质粒载体的不同转染方式及其特点进行了初步的探讨。