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目的:研究JAK2/STAT3通路在缺血预处理中对大鼠心肌细胞再灌注损伤的调控作用,从信号转导水平探讨加味丹参饮对梗死大鼠心肌的保护机制。方法:1.健康Wister大鼠90只,每只250-300g,适应性喂养一周后,将90只大鼠按照随机数字法分为NC组(正常组)、I/R组(缺血再灌注组)、IPC组(缺血预处理组)、JDD组(加味丹参饮预处理组)、IPC+RPM组(缺血预处理组+STAT抑制剂雷帕霉素组)、JDD+RPM组(加味丹参饮+雷帕霉素组)、IPC+AG490组(缺血预处理组+JAK抑制剂α-氰基-(3,4-羟基)N-苄苯乙烯胺组)、JDD+AG490组(加味丹参饮+JAK抑制剂α-氰基-(3,4-羟基)N-苄苯乙烯胺组)、JDD+10058-F4组(加味丹参饮预处理+c-myc抑制剂10058-F4组)。制作心肌缺血再灌注模型,实时监测心电图,心电图ST段向上抬高为结扎成功。结束后1.取各组大鼠各三只以Evans-bule,TTC双染色法染色心肌,测定心肌梗死面积,梗塞面积以坏死心肌重量与缺血区心肌重量之比表示。再取各组大鼠各三只石蜡包埋,石蜡包埋,切片,二甲苯脱蜡,常规HE染色,树脂封片。在光镜下以HP10x40行细胞心态学观察。2.取各组大鼠各三只Western blot测定各组心肌细胞JAK2、STAT3蛋白的表达。3.PCR测定各组大鼠心肌细胞c-myc基因表达。最后应用SPSS17.0 for Windows统计软件将实验结果进行统计学处理。多组比较采用单因素方差分析,p<0.05认为有统计学意义。结果:1.以心电图出现弓背样抬高为结扎成功。结扎冠脉不同的时间后可造成心肌细胞不同程度的缺血损害。i/r组st段向上抬高约0.75(心电图背景的一竖格记为1)。加味丹参饮预处理组与ipc组反复4次的5min结扎,10min再灌注的预处理后,再缺血结扎时,st抬高为0.50,下降了约33.3%(p<0.05)。2.ipc组比i/r组梗死面积减少11%;jdd组与ipc组相比,梗死面积减少3%(p<0.05)。ipc+ag490组与ipc组相比,梗死面积增加5%(p<0.05)。3.病理结果:i/r组的心肌纤维变长,排列紊乱和断裂,肌纤维间距增宽,肌节缩短,排列不规整,间质水肿、充血或出血,有炎症细胞浸润。ipc组与加味丹参饮预处理组虽有心肌的损伤但是心肌肌原纤维排列较规整,肌节排列亦较为整齐,偶见炎性细胞与红细胞浸润,病变较i/r轻。4.i/r组的蛋白表达低于其他8组,有显著差异(p<0.05)。jdd组、ipc组jak2、stat3表达与i/r组比较,有明显的差异(p<0.05)。ipc+ag490组,ipc+rpm组,ipc+10058-f4组的stat3蛋白表达明显低于ipc组,有显著性差异(p<0.05)。同时ipc+rpm组蛋白表达高于ipc+ag490组,有显著性差异(p<0.05)。jdd组、ipc组与i/r组比较,有明显的差异(p<0.05),ipc组与jdd组比较结果无差异(p>0.05)。5.i/r组中myc低表达,ipc组中myc高表达,有显著差异(p<0.05)。jdd组myc基因表达量高于i/r组,有非常显著性差异(p<0.01)。而ipc+rpm组、ipc+ag490组抑制了jak2、stat3后myc基因呈低表达,有显著性差异(p<0.05)。结论:1.在心肌梗死再灌注后存在缺血再灌注损伤,其产生机制与jak/stat信号通路有关。2.加味丹参饮预处理对心肌缺血再灌注的损伤有保护作用,减轻心肌缺血再灌注损伤,降低心电图抬高的st段,改变心肌细胞的病理形态学,其机制与jak/stat转导通路的干预有关,加味丹参饮预处理通过激活jak2/stat3转导通路,上调c-myc基因的表达,参与心肌细胞凋亡的保护。