人乳腺癌肿瘤干细胞的分离培养及生物学特性之初探

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目的:在原代分离出的乳腺癌肿瘤细胞中分选出CD44~+CD24-/LOW表达的细胞,并计算出CD44~+CD24-/LOW细胞,CD44~+CD24~+细胞和CD44-细胞的数量比例。初步认定CD44~+CD24-/LOW细胞可能是干细胞。方法:通过机械分离,酶消化法在乳腺癌肿瘤组织中分离出乳腺癌肿瘤细胞;将其培养后运用免疫磁珠两步法,分离出CD44~+CD24-/LOW细胞,通过细胞计数,分别计算CD44~+CD24-/LOW细胞,CD44~+CD24~+细胞和CD44-细胞的数量比例。结果:在乳腺癌肿瘤原代细胞中分离出了CD44~+CD24-/LOW细胞。CD44~+CD24-/low细胞数量约占2.5%,而CD44~+CD24~+细胞约占30%左右,CD44-细胞混合群约占67.5%左右。结论:乳腺癌组织中有CD44~+CD24-/LOW细胞,且CD44~+CD24-/LOW细胞可能是人乳腺癌肿瘤干细胞。目的:对比从原代分离出来的乳腺癌肿瘤细胞中分选出的CD44~+CD24-/LOW细胞与CD44~+CD24~+细胞和CD44-细胞的生长增殖能力,运用电子显微镜观察3群细胞的形态特点,并探讨三群细胞ER,PR, HER-2的表达情况。方法:培养刚分选完毕的CD44~+CD24-/LOW细胞,CD44~+CD24~+细胞和CD44-细胞,绘制三群细胞的生长曲线;以光学显微镜和电子显微镜观察三群细胞的形态特点。并以免疫组化方法测定三群细胞的ER,PR, HER-2的表达。结果:根据3群细胞的生长曲线发现,在相同培养条件下, CD44~+CD24-/LOW细胞的生长增殖能力最强,CD44-细胞能力最弱;通过透射电子显微镜观察,CD44~+CD24-/LOW细胞的细胞核大而圆,核浆比大于1/2.核仁颜色深浓,细胞器少,游离多聚核糖体丰富,细胞微绒毛稀少短小。CD44~+CD24-/LOW细胞的ER,PR, HER-2均为阴性,而与肿瘤组织的ER(~+~+),PR(-), HER-2(-)表达不同。结论: CD44~+CD24-/LOW细胞是肿瘤生长增殖的源泉,且CD44~+CD24-/LOW细胞比CD44~+CD24~+细胞与CD44-细胞幼稚,提示CD44~+CD24-/LOW细胞是人乳腺癌肿瘤干细胞。
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