葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量及药效作用的影响

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chinajiang
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目的:通过HPLC检测葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量的影响;通过致热法、致急性炎症法、致痛法、致咳法复制感冒相关动物模型,观察葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤解热作用、抗炎作用、镇痛作用、止咳作用、免疫功能的影响。探讨葛根在升麻葛根汤中最佳煎煮时间,为葛根特殊煎煮方法的临床应用提供实验依据。方法:采用HPLC检测葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量的影响,色谱条件:Agilent 5 TC-C18液相色谱柱(250×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(25:75),柱温30℃,流速1 mL/min,检测波长250 nm,进样量10μL。采用15%酵母混悬液致热法、蛋清致急性炎症法、热板致痛法、25%氨水致咳法复制感冒相关动物模型,观察感冒相关模型动物体温、足趾肿胀率、痛阈值、咳嗽潜伏期、咳嗽次数、脾脏系数、胸腺系数和免疫因子(IL-6)含量。结果:HPLC检测,葛根素在0.020.12mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.9996);1号汤剂供试品溶液中葛根素含量是30.0 mg/g;2号汤剂供试品溶液中葛根素含量是34.8 mg/g;3号汤剂供试品溶液中葛根素含量是38.4 mg/g;4号汤剂供试品溶液中葛根素含量是43.6mg/g;5号汤剂供试品溶液中葛根素含量是42.4mg/g;6号汤剂供试品溶液中葛根素含量是41.2mg/g;7号汤剂的供试品溶液中葛根素的含量是39.6mg/g;8号汤剂的供试品溶液中葛根素的含量是36.4 mg/g;9号汤剂的供试品溶液中葛根素的含量是36.0mg/g。体温检测,与空白组比较,模型组注射15%酵母混悬液后1h、2.5h、3-8h时,体温明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,阳性对照组1、阳性对照组2在给药后1h、2.5h、3-8h时,体温明显降低(P<0.01);葛根煎煮30min、35min、40min组在给药后2.5h、3-8h时,体温明显降低(P<0.05或P<0.01);葛根煎煮25min组在给药后4-7h时,体温明显降低(P<0.05)。足趾肿胀率检测,与空白组比较,模型组在注射蛋清液后0.5h、1-4h时,足趾肿胀率明显升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min、50min、55min、60min组在给药后0.5h、1-3h时,足趾肿胀率明显降低(P<0.05或P<0.01或P<0.01);葛根煎煮20min、25min组在给药后0.5h、1-2h时,足趾肿胀率明显降低(P<0.05)。痛阈值检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min组痛阈值明显升高(P<0.05)。咳嗽潜伏期、咳嗽次数检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min组咳嗽潜伏期明显升高(P<0.05或P<0.01);阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮35min、40min组咳嗽次数明显降低(P<0.05)。脾脏、胸腺指数检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min、50min、55min组脾脏系数明显升高(P<0.05或P<0.01);阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min、50min组胸腺系数明显升高(P<0.05或P<0.01)。酶联免疫法(ELISA)检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮25min、30min、35min、40min、45min组IL-6含量明显升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论:煎煮过程中,当葛根煎煮35min时升麻葛根汤中葛根素含量相对最高,对感冒相关模型动物体温、足趾肿胀率、痛阈值、咳嗽潜伏期、咳嗽次数、免疫功能均能产生明显改善作用。葛根在升麻葛根汤中使用“先煎”的特殊煎煮方法,可能起到提高临床疗效的作用。
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