翠云草生药学研究

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翠云草Selaginella uncinata(Desv.)Spring.系蕨类卷柏科卷柏属Selaginella植物。该属植物全世界有700多种,我国分布约60~70余种,其中22种具有药用价值。中国药典收载该属植物卷柏S.tamariscina(Beauv.)Spring.和垫状卷柏S.pulvinata(Hook.et Grev.)Maxim.为中药卷柏的法定品种。卷柏属其它的20余个品种也分别为制剂原料或常用中草药。现代药理研究表明卷柏属的药用种不仅具有传统的清热、解毒作用还有抗肿瘤、降血糖、抗菌、增强免疫、镇痛等多种功效。植物化学研究表明该属植物含有大量的双黄酮类成分,此类成分具有明显的抗肿瘤、抗炎抗病毒、抗氧化、抗血栓和扩张血管等作用。因此加强对该属植物的研究开发,从中筛选出具有较强药用价值的品种,开发新的治疗心血管疾病和抗肿瘤的药物具有广阔的前景。翠云草是一种民间应用较广的中草药,具有清热利湿、止咳止血、抗菌消炎以及抗肿瘤的作用,应用于黄疸、肠炎、痢疾、肾炎水肿、肺结核咳血、风湿性关节炎、疖肿、烧伤、跌打损伤、外伤出血等症的治疗,具有较高的药用价值,广西已将其收入广西中药材标准(1990年版)。本文在前人研究的基础上对翠云草进行了形态和显微鉴别、化学成分研究、指纹特征及薄层色谱和含量测定等方面较为系统的生药学研究。卷柏、垫状卷柏、旱生卷柏等卷柏属药用植物的形态鉴别、化学成分研究已有报道,但对翠云草的相关研究报道现在还不多。在对湖北省翠云草药用资源进行调查过程中发现不同生境,不同采收期翠云草的性状有较为明显的变异。本文对不同生境,不同采收期三种翠云草进行了形态和显微鉴别比较研究,发现并总结了翠云草在性状、组织结构上的基本特征。该种具有较为特殊的组织构造如:茎横切面有突起的脊棱;皮层外侧为厚壁细胞,壁木化或微木化;中央有气室,中柱被丝状体悬吊在气室中央;木质部多分隔成并行的2束,1束较大,1束较小。以穗花杉双黄酮为对照品,对翠云草的三个样品进行了薄层色谱研究,结果显示三个样品均含有五个相同的双黄酮薄层色谱斑点,以此为标准,对翠云草进行鉴别,具有重要意义。针对卷柏属植物某些种的形态较为类似,易于混淆,其干燥后的药材用传统的形态学方法鉴定具有一定难度的特点,本文运用HPLC方法对包括翠云草在内的10种卷柏属药材进行了HPLC指纹特征研究,发现并确定了卷柏属这10种植物的5个主要指纹特征峰,这些主要指纹特征峰的存在与否及其相互之间的比例,对该属植物的品质评价和鉴定分析有重要的参考意义,也为翠云草的鉴别提供了指纹依据。在HPLC指纹特征研究的基础上测定了翠云草以及另外9种卷柏属样品中穗花杉双黄酮的含量,建立了穗花杉双黄酮含量测定方法,为卷柏属药材的质量控制提供了依据。采用溶剂法和色谱法对该植物的有效成分进行了提取分离,分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位,再经柱色谱分离,从乙酸乙酯部位中得到了4个单体化合物,并通过理化鉴别和UV、IR、1H-NMR、13C-NMR,鉴定其分别为穗花杉双黄酮(Amemoflavone,化合物Ⅰ)、罗波斯塔双黄酮(Robustaflavone,化合物Ⅱ)、罗波斯塔-4′-甲醚(Robustaflavone 4′-dimethyl ether,化合物Ⅲ)、2″,3″-二氢-4′-甲氧基穗花杉双黄酮(2″,3″-dihydro-4′-O-methyl amentoflavone,化合物Ⅳ)。化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅳ为新化合物。综上所述,本文对翠云草的性状、显微、化学成分、指纹特征、薄层色谱和含量测定进行了较为系统的研究,进一步充实了该植物的研究内容,为该植物药材质量标准的制定、品质评价以及进一步的开发奠定了基础,同时也对卷柏属其它药用种的研究开发提供了重要的参考价值。
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