研究背景 胰岛细胞的冷保存及移植后胰岛细胞和组织相容性的关系一直是困扰胰岛细胞移植的主要原因。本实验通过脑死亡器官捐赠者，探讨多器官联合切取人类胰岛细胞获取的方法，及高渗枸橼酸盐嘌呤溶液(Hypertonic citrate adenine solution，HC-A液)原位灌注后胰岛细胞的活性与冷缺血时间的关系。探讨国产HC—A液作为胰岛移植的保存液的可行性。而人类胰岛细胞移植入血后，会引起血细胞在胰岛细胞周围的凝集，加入肝素可以抑制这种现象的发生。目前器官移植中广泛的采用HLA配型的技术，不同的HLA配型后，胰岛细胞在血液中凝集现象是否有所改变，血液与胰岛细胞经过HLA配型后，对于胰岛细胞的活性影响如何，是本研究的另一重点。 方法 采用HC-A液1,500～2,000ml，经主动脉原位灌注后，进行肾—胰腺—十二肠—脾的联合切取，切取后分离肾与胰腺—十二肠—脾，采用胶原酶P消化胰腺，分离并纯化胰岛细胞，进行胰岛细胞活性染色，计算冷保存时间与胰岛细胞活性的关系。将已知HLA配型的胰岛细胞分别加入到HLA匹配组和错配组的血液当中去，对比观察混合培养1小时后的血液中血小板、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞变化，并于培养24小时后观察活性胰岛细胞的数量变化。 结果 胰腺与肾脏经HC-A液原位灌注满意，胰岛细胞的活性与冷缺血时间呈负相关，冷保存指数和胰岛细胞活性呈正相关。人类胰岛暴露于未经抗凝的人类血中，人类胰岛将诱发一个迅速血小板激活和消耗，中性粒细胞和单核细胞也被消耗；胰岛细胞都受到不同程度的损伤，加入肝素后这种反应明显减轻。经过HLA配型的胰岛细胞在血液中的活性明显高于HLA错配的胰岛细胞。 结论 在胰岛细胞移植中，经HC-A液保存的胰腺的冷缺血时间不宜超过5～6小时。胰岛细胞移植入血后，将引发血细胞在胰岛周围出现类似的炎症反应，胰岛细胞受到损伤；肝素能够减少初期的凝集反应；HLA配型有助于提高胰岛细胞移植存活。