[目的]胰腺癌以显著的结缔组织反应和丰富的细胞外基质为病理学特征,这些特征导致胰腺癌肿瘤内血管功能异常,进而抑制抗肿瘤药物在胰腺癌组织内的分布和抗肿瘤效果。纳米药物是目前药物研究的热点问题,有望克服体内的生物屏障和药物的毒副作用,从而达到更加安全有效的抗肿瘤治疗。而hedgehog通路在胰腺癌中异常激活并在结缔组织反应中扮演重要作用。我们希望通过特异性的hedgehog抑制剂维莫德吉来阻断hedgehog通路,进而抑制胰腺癌的结缔组织反应,减少细胞外基质,恢复肿瘤内血管的功能,从而促进SN38纳米药物在胰腺癌组织内的分布,提高抗肿瘤疗效。[方法]第一部分1.利用SN38化学合成使其与PLA连接,构建SN38-PLA分子,并与PEG-PLA大分子材料共组装制备SN38纳米颗粒。2.利用电镜、DLS、体外释放实验检测了 SN38纳米颗粒的表征和性质。第二部分1.利用CCK-8、集落形成实验、流式细胞凋亡实验检测SN38和SN38纳米颗粒对胰腺癌细胞的增殖和凋亡的影响。2.我们选择特异性的hedgehog抑制剂维莫德吉进行进一步研究,利用CCK-8、集落形成实验、流式细胞凋亡实验检测维莫德吉在胰腺癌细胞增殖、凋亡的作用以及维莫德吉与SN38联用对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。3.构建bxpc-3胰腺癌细胞系皮下瘤模型和患者来源的肿瘤移植模型,在胰腺癌细胞系皮下瘤模型和患者来源的肿瘤移植模型中观察维莫德吉对hedgehog通路和细胞外基质以及肿瘤内血管的影响和药物联用对胰腺癌的疗效。[结果]第一部分1.SN38-PLA与PEG2k-PLA5k可通过丙酮法共组装形成纳米颗粒,该纳米颗粒的粒径为50.7±0.483 nm,且具有良好的球形形态。2.SN38纳米颗粒在37℃ pH 7.4和4.6的条件下具有良好的缓释特性,在72小时的药物释放量分布为16.77±1.11%和21.67±1.01%。第二部分1.游离SN38和SN38纳米颗粒的半数最大抑制浓度(IC50)在bxpc-3细胞中分别为 0.52±0.08 和 0.47±0.06 μM,在 PANC1 细胞中分别为 1.79±0.10 和 1.01±0.15μM,在 L3.6PL 细胞中分别为 4.96±0.41 和 4.64±0.32 μM。且游离 SN38 和 SN38纳米颗粒都可以有效诱导胰腺癌细胞的凋亡以及凋亡相关蛋白的表达。2.在体外,维莫德吉在bxpc-3,L3.6PL和PANC1细胞中可以有效抑制GLI-1 mRNA和蛋白的表达,且维莫德吉对胰腺癌细胞没有明显的毒性作用,与游离SN38和SN38纳米颗粒联用都不能增强SN38的细胞杀伤作用。3.在体内,维莫德吉在bxpc-3模型中可以有效抑制GLI-1 mRNA和蛋白的表达,减少细胞外基质成分fibronectin的表达和分布,促进肿瘤内血管的开放和纳米颗粒在肿瘤内的分布。4.维莫德吉对裸鼠无明显的毒性作用,且与SN38纳米颗粒联用对bxpc-3皮下瘤和PDX模型的治疗效果显著优于单用SN38纳米颗粒。[结论]1.基于SN38-PLA和PEG2k-PLA5k可以共组装构建结构稳定的纳米颗粒,该纳米颗粒显著提高了SN38的水溶性,使其能在液体环境中稳定存在;2.维莫德吉可以在体内阻断胰腺癌细胞hedgehog信号通路的激活,进而有效减少胰腺癌细胞外基质的含量,从而促进胰腺癌血管的开放,最终提高SN38纳米颗粒在肿瘤内的分布。维莫德吉与SN38纳米颗粒联用可以有效提高SN38纳米颗粒的治疗效果,这为胰腺癌患者的临床治疗提供了新的思路和治疗方案。