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在牙周组织修复与再生的临床实践中,牙周支持组织缺失是大多数牙周修复失败的主要原因之一。如何制备性能优良的引导组织再生膜是目前牙周组织修复与再生中亟待解决的关键问题。天然鸡蛋壳膜具有良好的微生物阻隔性、生物相容性以及相互通透的多孔网状结构,并且一侧致密一侧疏松,与引导组织再生(Guided Tissue Regeneration,GTR)膜结构极为相似,但因其力学强度差不能直接用作GTR膜。合成高分子,如聚乳酸-羟基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA)、聚己内酯(Polycaprolactone, PCL)等,机械强度高,可纺性好,但生物相容性较天然高分子差。与其它成膜技术相比,静电纺丝技术制备的纳米纤维膜形态结构类似细胞间质,更有利于细胞的粘附、生长和分化。基于GTR膜的性能要求,本研究将酸溶液水解技术、静电纺丝技术、致孔剂沥滤技术结合在一起,旨在构建一种兼有良好生物相容性和一定力学强度的新型GTR膜。本研究包含四个部分:1. SEP/PLGA纤维膜的制备及理化性能检测采用酸溶液水解法从天然鸡蛋壳膜中提取可溶性鸡蛋壳膜蛋白(SolubleEggshell Membrane Protein, SEP),将其与PLGA按照不同比例共混电纺,制备SEP/PLGA电纺纤维膜。扫描电镜(Scanning Electron Microscope, SEM)观察表面形貌,检测接触角、拉伸强度,傅里叶红外光谱分析混合物构象。结果显示:不同质量比的SEP/PLGA纤维膜均呈现相互交联的多孔网状结构。红外光谱测试表明两者成功共混。随着纤维膜中PLGA含量的增加,纤维膜的拉伸强度、断裂伸长率相应增大,不同比例间有显著差异(P<0.05);随着SEP含量的增加,纤维膜的接触角变小,亲水性提高,但不同比例间无显著差异(P>0.05)。实验表明SEP/PLGA纤维膜具有一定的力学强度和亲水性。2. SEP/PLGA纤维膜体外降解性能的研究将SEP/PLGA纤维膜在模拟体液中降解,分析降解过程中纤维膜结构、表面形貌、质量、断裂强度的变化。结果显示:SEP/PLGA纤维膜的质量、断裂强度随着降解时间的延长而逐渐降低,在降解前2w下降速度较快,从2w到6w速度减慢,在降解6w时纤维吸水发生溶胀,纤维粘连,但结构仍完整并保持一定的力学强度。3. SEP/PLGA纤维膜细胞相容性的评价将牙周膜细胞(Periodontal Ligament Cell, PDLC)与纤维膜复合培养,用四氮唑盐(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dimphenyltetrazolium bromide,MTT)法评价纤维膜的细胞相容性。结果显示:PDLC在纤维膜表面伸展充分,细胞之间通过伪足相连。MTT测试表明PDLC在纤维膜有较强的增殖能力。4.电纺SEP/PLGA-PCL双层不对称纤维膜及其细胞相容性研究采用复层电纺结合致孔剂沥滤方法制备双层不对称纤维膜——含有大孔径(疏松)的SEP/PLGA纤维膜层和小孔径(致密)的聚己内酯(PCL)纤维膜层。通过ImageJ软件对电镜照片进行测量,计算双层纤维膜的孔径,并将PDLC细胞与纤维膜复合培养,观察细胞在致密层和疏松层生长情况,MTT法评价SEP/PLGA-PCL纤维膜的细胞相容性。结果显示:SEP/PLGA纤维膜层(疏松层)孔径为21±1.3μm,PCL纤维层(致密层)孔径为3.3±0.4μm。PDLC细胞与双层纤维膜的复合培养观察,细胞在致密层仅能贴附表面生长,而在疏松层细胞可长入孔洞内并且数目较多。本研究利用静电纺丝技术构建SEP/PLGA-PCL双层不对称纤维膜,并从理化性能、体外降解性和细胞相容性方面对其进行评价。结果证明SEP/PLGA-PCL纤维膜可作为一种具有潜力的GTR膜。