利用U3RNA基因上游启动区构建ACC合成酶反义RNA-核酶嵌合基因高效表达载体及对烟草的转化

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研究人员人工合成了番茄U3RNA基因上游启动区(152bp),插入到质粒pGEM7zf(+)中,命名为pHu01.将pREI中的番茄ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合DNA序列构建在质粒pHu01中的人工合成的番茄U3RNA上游启动区的下游,得pHu02,然后将上述"启动区-反义RNA-核酶嵌 合序列"用限制酶切下来并插入pGEM3zf(+)中,得pHu03.将"启动区-反义RNA-核酶嵌合序列"通过酶切,补平,连接等手段克隆到植物双元表达载体pGA643中,得pGU3R.用三亲融 合法导入农杆菌LBA4404中,采用叶盘法转化烟草,诱导再生小植株,获得了卡那霉素的抗 性植株.
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