桑白皮为桑科植物桑Morus alba L的干燥根皮,具有泻肺平喘,利水消肿之功效,常用于肺热咳喘,水肿胀满尿少,面目肌肤浮肿等治疗。现代研究表明,桑白皮提取物具有降血糖、抗氧化、利尿、抑制蛋白糖激化等作用,桑白皮总黄酮为主要活性成分之一。桑属植物中的黄酮类化合物均连有异戊烯基,目前研究表明,带有异戊烯基结构的化合物均表现出很强的抗肿瘤作用、降血脂、降血糖作用。1980年,日本学者从桑白皮(Morus alba L.)脂溶性部位中发现了一种结构新颖的化合物,即Diels-Alder加合物,这种Diels-Alder型加合物是由查尔酮及其衍生物与连有异戊二烯基的化合物发生[4+2]环加成反应得到的产物,其中很多加成产物仍具有异戊烯基黄酮结构,这种桑白皮脂溶性部位中分离到异戊烯基黄酮类和芪类化合物。另外,从桑白皮水溶部位分离到具有明显降血糖活性的多羟基生物碱类化合物,其中活性最好的为多羟基生物碱1-脱氧野尻霉素。异戊烯基黄酮类化合物有多种生物活性,如细胞毒活性,抗血小板活性,对花生四烯酸、环氧酶、酪氨酸酶、组织蛋白酶K和α-还原酶的抑制活性,以及抗炎、抗疟、抗菌、抗脂质过氧化和保肝等活性。Diels-Alder型加合物具有抗高血压、抗微生物、抗肿瘤、抗病毒、降血糖、抑制血小板凝聚和抗氧化等药理活性。本课题组一直致力于桑白皮活性成分的研究,已经从桑白皮(Morus alba L.)中分离出了水溶性有效部位和脂溶性有效部位,经过药理实验证实,这两个部位均具有明显的降糖降脂活性,脂溶性有效部位主要为Diels-Alder型加合物、异戊烯基黄酮以及芪类化合物三大类成分的混合物。本研究旨在从桑白皮脂溶性部位中分离并富集Diels-Alder型加合物和异戊烯基黄酮有效部位,并通过药理筛选桑白皮降糖降脂作用部位,为降糖新药的开发提供一些数据。第一部分文献研究归纳并总结国内外桑白皮有效成分、药理作用等研究进展,以及2型糖尿病致病机理和治疗方法。第二部分实验研究1.桑白皮中异戊烯基黄酮和Diels-Alder加合物含量测定；采用UV和HPLC测定,以桑辛素和桑根酮D为指标性成分,测定桑白皮提取物中异戊烯基黄酮和Diels-Alder加合物的含量。2.桑白皮中异戊烯基黄酮和Diels-Alder加合物提取分离工艺研究本课题前期基础采用串联高压大孔树脂和离子交换树脂同步分离桑白皮总黄酮有效部位。本研究采用溶媒法回流提取进一步分离异戊烯基黄酮和Diels-Alder加合物。通过对各个因素的考察,得到最佳的提取工艺：采用30BV体积的氯仿加热回流提取,回收氯仿提取物得异戊烯基黄酮有效部位；不溶物再加入30BV乙醚进一步回流提取,过滤,滤液减压回收至膏状物,真空干燥后得Diels-Alder加合物有效部位。得到各有效部位的纯度均在50%以上。3.桑白皮有效部位质量标准研究本研究旨在提取、分离桑白皮中异戊烯基黄酮和Diels-Alder加合物,探索其UV和HPLC含量测定方法并建立质量标准。4.桑白皮总黄酮单独使用,或与生物碱联合用药对2型糖尿病小鼠的降糖作用；采用高脂诱导联合STZ复制2型糖尿病模型,初步探讨桑白皮单独使用,或与生物碱联合用药对2型糖尿病小鼠的降糖效果。5.桑白皮中总黄酮、异戊烯基黄酮以及Diels-Alder加合物对高脂诱导STZ糖尿病模型小鼠的影响采用高脂诱导联合STZ复制2型糖尿病模型,初步探讨桑白皮中总黄酮、异戊烯基黄酮以及Diels-Alder加合物降糖降脂效果。