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研究背景:近年来,众多研究发现长非编码RNA(Long noncoding RNAs,IncRNAs)在肿瘤的发生发展中扮演着重要作用。LINC00152位于2p11.2,长度为828nt。已有研究表明LINC00152的表达异常与胃癌、肝癌的发生相关。然而LINC00152在人肺腺癌(Lung adenocarcinoma,LAD)中的生物学功能及潜在机制尚不明确。研究目的:探讨LINC00152在LAD中的表达以及相应的生物学功能,研究其潜在机制。研究方法:(1)通过TCGA数据库筛查LAD组织中LINC00152表达量。(2)利用荧光实时定量 PCR(Quantitative reverse transcriptase Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测LAD组织和癌旁正常组织及细胞系中LINC00152的相对表达量。(3)体外试验检测干扰LINC00152后对LAD细胞增殖能力的影响。(4)体内试验通过构建裸鼠移植瘤模型研究干扰LINC00152后对A549细胞体内成瘤能力的影响。(5)利用基因芯片筛查LINC00152调控的下游靶基因。(6)qRT-PCR及Western blot进一步验证下游靶基因。(7)核质分离试验、RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)试验、Pulldown试验及染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)试验研究 LINC00152 调控下游靶基因白介素24(interleukin,IL24)的分子机制。(8)构建IL24过表达质粒,通过拯救实验和Western blot验证LINC00152对下游靶基因IL24的调控作用。研究结果:(1)通过 TCGA 数据库(The Cancer Genome Atlas)发现 LINC00152在LAD组织中呈高表达。(2)qRT-PCR进一步筛查LINC00152在LAD组织和细胞系中的表达,发现LINC00152表达升高,且高表达的LINC00152与LAD的TNM分期、肿瘤大小以及淋巴结转移呈正相关,并且可以预示患者预后较差。(3)体外试验表明干扰LINC00152后可以抑制肿瘤细胞增殖,肿瘤细胞周期被阻滞于G1期,且肿瘤细胞凋亡增加。(4)裸鼠移植瘤模型发现敲低LINC00152表达可以减弱A549细胞体内成瘤能力。(5)基因芯片结果显示干扰LINC00152表达后,IL24表达水平升高。(6)qRT-PCR及Western blot试验进一步证明干扰LINC00152后,IL24的mRNA及蛋白表达水平均上调。(7)核质分离试验、RIP试验和Pulldown试验表明,LINC00152可绑定多梳蛋白抑制复合体2(polycomb-repressive complex 2,PRC2)和组蛋白去甲基化酶(Lysine specific demethylase1,LSD1);ChIP实验表明,LINC00152可募集Zeste基因增强子同源物 2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)至 IL24 的启动子区从而抑制 IL24转录。(8)拯救实验表明,过表达IL24可以部分逆转LINC00152促LAD细胞增殖的作用。研究结论:本项研究首次揭示了 LINC00152在LAD的发生发展中扮演着癌基因的角色,通过表观调控IL24促进了肿瘤细胞的增殖。同时LINC00152可作为治疗LAD的新靶点。