【摘 要】
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目的:探讨可注射导电水凝胶聚吡咯-壳聚糖（Polypyrrole-Chitosan,Ppy-Chi）联合人子宫内膜间充质干细胞来源的心肌样细胞（Human endometrial mesenchymal stem cells derived cardiac myocytes,h EMSCs-CMs）治疗大鼠慢性左心室心梗的有效性研究。方法:以六水三氯化铁为氧化还原剂,利用一步氧化还原法将聚吡咯接枝
【基金项目】
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国家自然科学基金“《可注射 Ppy-Chi-h BMSCs-CMs 类心肌组织通过抑制心室重构促进心电同步化修复大鼠心梗的实验研究》（编号:81900274）”； 山西省研究生教育创新项目“《可注射导电材料联合子宫间充质干细胞诱导来源的心肌细胞修复大鼠心梗的实验研究》（编号:2020SY250）”； 山西省重点研发项目“《
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目的:探讨可注射导电水凝胶聚吡咯-壳聚糖（Polypyrrole-Chitosan,Ppy-Chi）联合人子宫内膜间充质干细胞来源的心肌样细胞（Human endometrial mesenchymal stem cells derived cardiac myocytes,h EMSCs-CMs）治疗大鼠慢性左心室心梗的有效性研究。方法:以六水三氯化铁为氧化还原剂,利用一步氧化还原法将聚吡咯接枝到生物材料壳聚糖上,构建出Ppy-Chi导电复合材料,戊二醛作为交联剂进行凝集形成水凝胶。在体外,扫描电镜观察其表面颗粒度及多孔结构;循环伏安法检测复合材料的导电性能;通过共培养子宫内膜间充质干细胞,研究其生物相容性;通过体外凝集时间和随时间质量丢失情况,研究其凝集和降解特性。利用复合酶液解法分离EMSCs,采用贴壁培养并进行传代。应用流式细胞术检测其表面标志物;通过诱导分化实验检测其多向（成脂、成骨、成软骨和成心肌）的分化能力。在体内,结扎大鼠心脏左前降支来制备心梗模型,利用心电图、PET-CT来评估模型是否制备成功。造模成功4周后,动物随机分为4组（Ppy-Chi-EMSCs-CMs、Ppy-Chi、EMSCs-CMs、对照组）,分别将上述材料移植于心梗及周边区,用超声来评估心功能的改善情况。结果:在本研究中,成功地构建了Ppy-Chi导电水凝胶。与对照组Chi水凝胶相比,Ppy-Chi复合材料具有多孔结构,表面粗糙呈颗粒状,并且具有良好的导电性;两种水凝胶均可支持细胞的生长和增殖,具有良好的生物相容性。以上说明新构建的复合材料是较为理想的细胞载体。Ppy-Chi水凝胶相比Chi水凝胶更加稳定,有利于其在体内长期发挥作用。通过复合酶液消化法可以成功分离h EMSCs并且进行传代培养。h EMSCs呈贴壁旋涡状生长,流式细胞术显示P3代h EMSCs高表达CD44、C D73、CD90、CD105（>95%）,而CD11b、CD34、CD45、HLA-DR呈低表达（<5%）,说明本研究所使用的干细胞是纯度高的子宫间充质干细胞。并且成脂、成骨、成软骨和成心肌的分化检测上,均证明了该种细胞具有良好的分化潜能。体内实验部分,本研究成功地制备了大鼠心梗模型,心电图显示出现病理性Q波。将Ppy-Chi-EMS Cs-CMs类心肌组织用于大鼠心梗的治疗,超声心动图结果显示射血分数和缩短分数均有改善;18F-FDG Micro PET/CT初步探索发现可以直观地观察到心梗区域。结论:Ppy-Chi复合导电水凝胶联合EMSCs-CMs可以增强心梗后心功能恢复,改善预后,为缺血性心肌病提供新的治疗策略。
其他文献
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大蒜是一种常用的药食两用的中药材,医学研究表明,大蒜具有抗菌、抗病毒、抗真菌与增强免疫等多种功效。大蒜多糖（Garlic polysaccharide,GPS）是从大蒜鳞茎中提取的主要活性成分,具有增强免疫、抗氧化、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、保肝等多种生物活性。硒是人类和动物必不可少的微量元素,具有突出的抗氧化和增强免疫作用,对维持机体健康十分重要。硒多糖不仅兼有硒和多糖的优点,而且还具备硒多糖所特有
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