目的：1．建立一种新的组织化学方法，该方法以毛细血管内皮细胞酶的差异分布为基础，动脉段毛细血管和静脉段毛细血管分别呈现碱性磷酸酶（AP）和二肽肽酶（DPP IV）活性，将毛细血管进行双变量标定，区分为动脉段毛细血管和静脉段毛细血管。从而为组织的氧供提供更近实际的毛细血管的结构信息，可以从多角度估价各种负荷条件下毛细血管几何结构的变化。与此同时，建立大鼠冠状动脉梗阻模型，用双染色法观察冠脉阻塞大鼠及老年鼠左心室毛细血管几何结构的改变。目前国内未见本法相关报道。2．通过铸型的方法获得心肌微血管的三维结构，观察人，猪，大鼠冠状动脉种属间的差异。 方法：1．双染色法的建立。16只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（体重300±20g）苯巴比妥钠麻醉（4mg/100g.）后将15μm彩色微球经大鼠的主动脉根部及冠状动脉直接注入，心脏快速切下，称重，液氮冷冻，冰冻切片。左室心肌切片进行双染色和CD31、CD34免疫组化标记，结果进行形态学分析。2．大鼠经左侧开胸暴露心脏，人工通气，结扎冠状动脉左降支，术后45天取下心脏做组织切片进行形态学分析。伪手术组作为对照。3．用玻璃单体灌注人，猪和大鼠的心脏，收集冠状动脉树和微血管的扫描电镜资料进行人，猪和大鼠冠状动脉间的比较分析。 结果：1．正常大鼠的毛细血管的域面积（CDA）在VC段显著减少（P＜0.01）。VC段毛细血管有更大的直径（AC vs VC 5.6±0.2μm vs6.9±3.2μm）；变异系数VC段明显高于动脉段（0.06±0.01 vs 0.82±0.05）双染色所得毛细血管的密度和数量与CD31和CD34的免疫组化结果比较没有显著性差异。2．冠脉梗阻组大鼠毛细血管几何结构的改变。非缺血带的毛细血管密度较伪手术组高（2712±359 vs 2411±21 p＜0.05），毛细血管的域面积在过渡带显著高于非缺血带（635±201μm vs 502±143p＜0.01）。心肌细胞的横断面积伴随毛细血管/心肌纤维比值的增高而增高3．老年鼠组：老年鼠组与正常成年对照示微动脉和毛细血管的动脉段毛细血管的密度减少，域面积增加，毛血血管总的密度没有显著性改变，。 结论：l．本方法在大鼠心肌内微血管结构的研究中从方法学上讲是可行的；研究发现毛细血管的几何结构在动脉段和静脉段之间存在着显著的差异，在毛细血管的静脉段，血管的直径和密度增加，毛细血管片段的长度减少。这样随着血液在趋向静脉流动伴随氧分压的降低，这些结构上的特点更有利于氧的弥散。2．在冠状动脉梗阻的大鼠，心肌组织内毛细血管床的塑型是不一致的，非缺血带毛细血管的域面积减少，与此同时，过渡带毛细血管的域面积增加，在梗塞后45天的大鼠，毛细血管的增生速度落后于心肌细胞的肥厚。3．在老年鼠冠脉系统的微小动脉减少，毛细血管的结构没有显著的改变。