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目的精神情志问题是导致肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)发生的主要诱因之一,且为其重要临床特征。故本实验以急性与慢性应激相结合的方法诱导的腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)模型大鼠为研究对象,以纽蛋白(vinculin)及NGF-Trk A信号通路为切入点,从中医心与脾胃的联系出发,选择电针内关、公孙配穴对IBS-D模型大鼠进行治疗,探索心胃同治指导下的配穴对伴情志障碍的IBS-D的疗效及可能的效应机制,丰富IBS-D的中医理论内涵,为针灸临床治疗IBS-D提供实验依据。方法选用12周龄SPF级SD雄性大鼠40只,体重在180-200g之间。对大鼠进行1周的适应性喂养后,采用随机数字表法将大鼠分为4组:空白组、模型组、西药组、心胃同治组,每组各10只。以临床IBS患者病因病理研究为基础,本实验采用急性与慢性应激相结合的方法制备IBS-D大鼠模型,实验周期为28天。所有大鼠饲喂普通饲料。空白组不作任何处理;模型组大鼠建立IBS-D模型,每日作抓取、鼠衣穿戴、悬挂训练;西药组大鼠建立IBS-D模型的同时,予0.3 mg/m L匹维溴铵混悬液灌胃,药量比例为15 mg/kg,qd;心胃同治组大鼠建立IBS-D模型的同时,采用电针双侧内关、公孙穴治疗,接电针连续波,频率2HZ,电流强度1m A,每次15min。对大鼠的一般情况、行为学变化、排便习惯进行观察和记录,运用HE染色观察结肠组织形态变化、采用ELISA检测血清中vinculin抗体和Cdt B抗体水平、运用Western blotting检测结肠组织中的NGF、Trk A的表达水平。结果1.大鼠一般情况、行为学及腹泻情况的观察:空白组大鼠实验全程精神状况佳,反应敏捷、活动自在,皮毛光滑白净,爪甲干爽,官窍无异常分泌物,粪便色褐黑、呈颗粒状,干湿适中,数量正常。模型组大鼠实验全程精神状况、反应灵敏度、毛发爪甲光洁度持续变差,官窍逐渐出现分泌物,粪便稀溏化,甚则出现大小便失禁情况,体重增长情况差,失去糖水偏爱,结肠敏感性增高。心胃同治组大鼠造模干预前两周一般情况同模型组,从第3周开始,大鼠的一般情况好转,体重增长率增加。西药组一般情况略差于空白组,在前两周明显优于模型组及心胃同治组,实验结束时,与心胃同治组无明显差异。各组大鼠PS值的结果显示,造模及干预结束后,空白组与适应性喂养阶段相比未见明显差异(P>0.05),模型组较空白组显著降低,且差异有统计学意义(P<0.05),心胃同治组及西药组虽较空白组降低,但明显高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),心胃同治组较西药组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠Bristol评分结果显示,模型组较空白组、心胃同治组及西药组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);心胃同治组及西药组较空白组稍低,差异均无统计学意义(P>0.05);西药组较心胃同治组稍低,差异无统计学意义(P>0.05)。AWR结果显示,给各组大鼠结肠施加的压力为20mm Hg或40mm Hg时,模型组AWR评分较空白组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),西药组AWR评分较空白组升高,差异有统计学意义(P<0.05),心胃同治组AWR评分明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),稍低于西药组、高于空白组,但均无统计学差异(P>0.05);给各组大鼠结肠施加的压力为60mm Hg或80mm Hg时,空白组AWR评分较模型组、心胃同治组及西药组低,只与模型组有统计学差异(P<0.05);模型组、心胃同治组及西药组之间两两比较,AWR评分均无统计学意义(P>0.05),但心胃同治组的AWR评分均较西药组稍低。2.各组大鼠结肠组织细胞结构观察:模型组大鼠结肠组织可见明显损伤现象,肠上皮结构破坏明显,肠绒毛排列紊乱,平滑肌肌层变薄,在肠黏膜的下层未见水肿现象发生。心胃同治组及西药组较模型组而言,结肠黏膜结构较为完整,偶见少量绒毛脱落及轻微断裂现象,固有层可见平滑肌层存在,黏膜下肌层厚度增加。各组均无炎性细胞浸润及水肿现象。3.大鼠血清vinculin抗体及Cdt B抗体的表达:空白组大鼠血清vinculin抗体OD值明显低于模型组和心胃同治组,差异有统计学意义(P<0.05),与西药组比较略低,差异无统计学意义(P>0.05);心胃同治组和西药组血清vinculin抗体均较模型组低,差异均有统计学意义(P<0.05);心胃同治组大鼠vinculin抗体OD略高于西药组,无统计学意义(P>0.05)。对各组大鼠血清Cdt B抗体光密度值的检测显示,空白组明显低于模型组、心胃同治组及西药组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠明显高于心胃同治组和西药组,差异有统计学意义(P<0.05);心胃同治组高于西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.大鼠结肠组织蛋白WB分析:模型组、心胃同治组、西药组大鼠结肠组织NGF、Trk A的蛋白表达量较空白组明显增多,且其分别与GAPDH的比值均大于空白组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠NGF、Trk A的蛋白表达量最高,其与GAPDH的比值较心胃同治组及西药组存在统计学意义(P<0.05);心胃同治组大鼠结肠NGF、Trk A蛋白表达量低于西药组大鼠,差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针内关、公孙配穴可改善IBS-D大鼠其心理状态、减低其内脏敏感性,平衡大鼠肠道动力,减低大鼠肠道vinculin、NGF、Trk A蛋白表达,从整体改良IBS-D大鼠症状,并表现出远期治疗优势。