【摘 要】
：
目的通过网络药理学及实验,从终末糖基化产物-终末糖基化产物受体（AGEs-RAGE）途径及短波紫外线（UVB）诱导的氧化应激途径,探讨小柴胡汤影响黑素合成的作用机制。方法1.网络药理学部分:利用TCMSP、TCMID检索小柴胡汤活性成分及作用靶点,Gene Cards、NCBI Gene数据库获取黑素合成相关靶基因,STRING数据库进行核心靶点信息蛋白互作分析,Cytoscape软件分析网络属性
论文部分内容阅读
目的通过网络药理学及实验,从终末糖基化产物-终末糖基化产物受体（AGEs-RAGE）途径及短波紫外线（UVB）诱导的氧化应激途径,探讨小柴胡汤影响黑素合成的作用机制。方法1.网络药理学部分:利用TCMSP、TCMID检索小柴胡汤活性成分及作用靶点,Gene Cards、NCBI Gene数据库获取黑素合成相关靶基因,STRING数据库进行核心靶点信息蛋白互作分析,Cytoscape软件分析网络属性,构建可视化网络图。Metascape数据库对所得结果进行GO富集分析及KEGG富集分析,Auto Dock Tools、Auto Dock Vina分子对接,Py Mo L作图及可视化处理。2.实验部分:使用CCK-8法检测不同浓度AGEs、不同剂量UVB及小柴胡汤醇提物对细胞活力的影响;Fontana-Masson染色观察细胞黑素分布;Na OH裂解法检测黑素含量;可见分光光度法检测酪氨酸酶活性;Western blot检测MITF、ERK、p-ERK等蛋白表达;q PCR检测黑素合成相关基因MITF、TYR、TRP-1、TRP-2 m RNA的表达;荧光检测gp100表达及ROS水平。结果1.共得到小柴胡汤有效靶点282个,黑素合成相关靶点439个,交集靶点62个。活性成分有白花前胡乙素、异鼠李素、汉黄芩素等,核心靶点有AKT1、TP53、MAPK3等,活性成分与靶点均具有良好的对接活性。核心靶点显著富集于癌症相关通路、AGEs-RAGE信号通路、PI3K-AKT通路、细胞衰老通路等。2.UVB辐射强度为300 m J/cm~2时对细胞活力无明显影响。与空白对照组相比,UVB及α-黑素细胞刺激素（α-MSH）能够促进B16F10细胞黑素生成（P＜0.01）,A375细胞中未观察到明显黑素产生;UVB促进B16F10细胞及A375细胞MITF表达（P＜0.01,P＜0.05）,提高B16F10细胞TYR活性（P＜0.01）,α-MSH能够促进B16F10细胞、A375细胞的MITF表达（P＜0.01）,TYR活性（P＜0.01,P＜0.05）;免疫荧光结果显示,B16F10细胞表达gp100,A375细胞中未观察到明显的gp100表达。3.小柴胡汤醇提物浓度为10μg·m L-1,AGEs浓度为10μg·m L-1时对B16F10细胞活力无明显影响。与空白对照组相比,AGEs能够促进黑素合成（P＜0.01）,提高MITF、RAGE表达及TYR活性（P＜0.01）;与AGEs组相比,小柴胡汤醇提物能够抑制RAGE的表达（P＜0.01）,但对AGEs诱导的黑素合成无明显抑制作用;q PCR结果表明,AGEs及小柴胡汤醇提物对黑素合成相关基因MITF、TYR、TRP-1、TRP-2 m RNA均无明显影响。4.与空白对照组相比,UVB组ROS含量及黑素合成明显升高,TYR活性增加,ERK、p-ERK、MITF表达增多（P＜0.01）;与UVB组相比,小柴胡汤醇提物组ROS及黑素含量降低,TYR活性降低,ERK、p-ERK、MITF表达下降（P＜0.01）。结论1.小柴胡汤能够通过“多成分-多靶点-多途径”的方式影响黑素合成;2.与A375细胞相比,B16F10细胞更适宜作为黑素合成相关研究的细胞模型,但仍需要更多的实验进一步证实;3.小柴胡汤醇提物能够降低AGEs诱导的RAGE表达,但对AGEs-RAGE诱导的B16F10细胞黑素合成无明显影响;4.小柴胡汤醇提物能够减轻UVB诱导的B16F10氧化应激反应,下调TYR活性及MITF表达,降低ERK磷酸化水平,抑制黑素合成。
其他文献
目的本次临床研究是在中医理论的基础上,运用“古今医案云平台”系统对导师严光俊教授诊治功能性便秘的临床病案进行信息采集及数据挖掘,分析症状、证型、治法、用药之间的关系,研究和总结导师严光俊教授“理肺通痞八法”的临床应用规律,有利于丰富功能性便秘的中医治法。方法收集本人于荆州市中医医院跟期间师（2019年10月至2021年12月）由导师予中药治疗的功能性便秘病案,严格依据纳入、排除标准及“理肺通痞八法
目的:借助古今医案云平台对近15年间的文献涉及治疗糖尿病足的中药方剂进行数据挖掘,以分析中医药治疗糖尿病足的用药规律,探讨总结其治疗思路及特点,以期对临床治疗糖尿病足有一定参考意义。方法:检索2006年1月至2021年12月发表在中国知网、CBM、万方数据、维普平台上有关中医药治疗糖尿病足的文献,筛选出符合条件的文献176篇,从中提取共计有210首方剂,其中包含81首内服方剂、129首外治方剂,整
目的:本文主要观察复元醒脑汤对糖尿病合并脑梗死大鼠PI3K、AKT蛋白、炎症因子TNF-α、IL-6表达水平的影响,以探究复元醒脑汤防治糖尿病脑梗死的部分作用机理。方法:选用SPF级健康雄性Wistar和GK大鼠共150只。将大鼠随机分为正常对照组（15只）、假手术组（15只）、模型组（30只）、西药组（30只）、中药组（30只）、FGF21组（30只）。正常组使用Wistar大鼠正常喂养,余组使
目的:本文通过搜集近20年中医化痰法辨治慢性支气管炎的文献,整理化痰法治疗慢性支气管炎的种类、化痰药物的证型及组方用药规律,为临床应用化痰法治疗慢性支气管炎提供辨证思路,为临床遣方用药提供参考。方法:采用频数分析及频率分析为主要方法,从数据库筛选近20年国内公开发表化痰法治疗慢性支气管炎的文献,逐篇阅读并删选文献,符合纳入标准总计450篇,收集完整的处方共500首。最后将纳入的处方录入中医辅助传承
目的本研究运用古今医案云平台对导师刘玲教授治疗催眠药物依赖性睡眠障碍患者的资料进行数据挖掘,总结归纳催眠药物依赖性睡眠障碍人群的基本特点,以及导师辨证论治的经验,从而更好地应用于临床。方法本研究纳入2020年11月至2021年11月于湖北省中医院脑病科刘玲教授专家门诊诊治且符合催眠药物依赖性睡眠障碍诊断的患者,共46例。进行数据录入、数据标准化后,运用古今医案云平台统计分析、关联分析、复杂网络分析
目的本研究通过观察益气通络汤联合利拉鲁肽治疗2型糖尿病下肢血管病变（气阴两虚兼血瘀证）的临床疗效,为今后的临床治疗提供有意义的数据支持。方法（1）选取湖北省中医院内分泌科的门诊及住院部2020年10月至2021年9月符合条件的54例患者,按随机分组原则均分为对照组和治疗组。（2）治疗前,对比分析两组患者的一般指标（年龄、性别、病程、BMI）及疗效指标（FPG、2h PG、Hb A1c、TC、TG、
目的通过观察肺热宁合剂联合西药治疗痰热壅肺型社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia,CAP）的临床疗效,客观评价其组方的安全性和有效性,为临床上治疗痰热壅肺型社区获得性肺炎提供新思路及新方法。方法选择2020年4月至2021年4月于湖北省荆州市中医医院住院收治的痰热壅肺型CAP患者50例,所有人均符合研究对象纳入标准。将50例患者随机分为治疗组及对照组,每组25例
目的:通过搜索各大科研文章统计网络上自建库起至2022年1月的所有已经发表的关于黄芪桂枝五物汤治疗神经根型颈椎病的随机对比临床应用研究的文章,并利用Meta（荟萃）分析的方式,深入研究黄芪桂枝五物汤对于神经根型颈椎病的临床疗效,观察其对临床评价指标的影响,为黄芪桂枝五物汤在治疗神经根型颈椎病的临床运用,提供循证依据。方法:使用我校图书馆网络检索管理系统,将“黄芪桂枝五物汤”、“随机”、“对照”、“
＜正＞因在新闻出版事业上的突出贡献,自1993年10月起享受政府特殊津贴。历任中国敦煌吐鲁番学会副会长,兼秘书长,敦煌研究院兼职研究员,浙江大学、中国人民大学、西北民族大学等高校兼职教授。多次应邀赴法、德、俄等国参加学术研讨会,主要著作有《西域文史论稿》《敦煌吐鲁番学论稿》《绝句一百首》,主编《中国历史宝库》等书,参加了《敦煌学大辞典》《中国大百科全书》“戏曲曲艺卷”和“音乐舞蹈卷”的编写工作。其
《唐宋时期敦煌大众的知识与思想》论题鲜明、材料翔实、论述清晰、结论正确，是一本诠释敦煌大众文化的力作。文中时该著论述敦煌大众文化的主旨、哲学基础、材料依据以及信仰文化多元一体特征的历史作用和现实意义做了阐发。