水稻联会复合体中央元件蛋白ZEP1的功能研究

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减数分裂是真核生物配子形成过程中的关键事件。在减数分裂前期Ⅰ,同源染色体经过配对、联会和重组等一系列复杂的相互作用稳定地结合在一起,从而保证后期Ⅰ的准确分离。在这些事件中,联会是指偶线期至粗线期,相互配对的同源染色体间形成的一种稳定的三维蛋白复合物,即联会复合体(SynaptonemalComplex,SC)。而对于SC各组分功能的探索一直是减数分裂研究的热点。  我们通过同源序列比对,在水稻中确定了拟南芥中编码联会复合体横向纤维蛋白基因ZYP1的同源基因,命名为ZEP1。以水稻品种日本晴为材料,克隆了ZEP1全长基因,深入研究了该基因在减数分裂过程中的生物学功能。通过制备ZEP1蛋白的多克隆抗体,借助免疫荧光染色反应,发现ZEP1在减数分裂细线期时以点状信号出现,偶线期时逐渐延伸。到了粗线期,随着同源染色体联会的完成,ZEP1的线状信号与染色体完全重合。利用透射电子显微镜观察,进一步证实ZEP1是水稻联会复合体的中央元件。在水稻ZEP1的Tos17插入突变体中,联会复合体不能形成,但同源染色体之间仍有交叉结产生,并且交叉结数目有增多的趋势。在zep1突变体的前期Ⅰ,重组蛋白MER3的数目显著增加,并且MER3和调控配对蛋白PAIR2的消失时间严重推迟。此外,我们还观察到在野生型前期Ⅱ和四分体时期,ZEP1能重新定位到染色体上,但随着染色体的浓缩,ZEP1开始从染色体上逐渐脱离。在小孢子发育早期仍然能在染色体观察到ZEP1的信号,但此后便完全消失。而zep1突变体中小孢子发育的早期,出现了染色体提前浓缩的表型。提前浓缩的染色体一直占据小孢子细胞的中央,使得细胞核不能向一侧迁移,最终导致花粉的败育。  因此,ZEP1作为水稻联会复合体的中央元件,除了参与联会复合体的形成外,还与小孢子发育早期染色体的解浓缩过程有着密切联系。
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