【摘 要】
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目的:旨在建立新的视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma,RB）原代细胞系和患者源性原位异种移植瘤（Patient-Derived Orthotopic Xenograft,PDOX）动物模型,并鉴定其基本特征。方法:采集R
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目的:旨在建立新的视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma,RB）原代细胞系和患者源性原位异种移植瘤（Patient-Derived Orthotopic Xenograft,PDOX）动物模型,并鉴定其基本特征。方法:采集RB患者临床信息和肿瘤标本,采用机械研磨法制备肿瘤原代细胞。通过体外培养、纯化与传代,建立新的RB原代细胞系,应用CCK-8法、H&E染色、免疫组织化学染色、全外显子测序等方法鉴定其基本生物学和基因组特征。通过原位移植入裸鼠视网膜下,进行体内成瘤与传代,建立PDOX模型,应用H&E染色、免疫组织化学染色等方法鉴定肿瘤模型的生物行为学和遗传学特征。结果:收集患者临床信息和标本32例,制备RB原代细胞27株,构建PDOX模型10个。建立2株RB细胞系,建系成功率为7.4%,分别命名为SNPH-Rb-C2和SNPH-Rb-C24,主要特征为:均呈葡萄串状、分枝状三维结构,悬浮生长;倍增时间约46和74小时,已传至第86和54代;为神经起源的肿瘤细胞,表达神经细胞粘附分子1（neural cell adhesion molecule 1,NCAM1）和突触素（synaptophysin,Sy N）;STR分型与原肿瘤组织个体来源一致;染色体核型未发现13号染色体长臂改变;与原肿瘤组织皆表现RB1+/+特征,且基因突变谱相似;具有体内成瘤能力。建立4个PDOX模型,建模成功率为40%,分别命名为SNPH-Rb-P2,SNPH-Rb-P3,SNPH-Rb-P7和SNPH-Rb-P9,主要特征为:PDOX与患者肿瘤组织形态相似;再现患者病程,肿瘤在动物眼内增殖、侵袭眼内结构,经淋巴系统发生颈部淋巴结转移、经视神经侵袭发生中枢神经系统转移和经眼眶侵袭发生眼眶视网膜母细胞瘤。P3代成瘤率和复苏率为100%。结论:本研究建立了2株新的RB细胞系和4个新的RB PDOX模型,保留了原肿瘤组织的生物行为学和遗传学特征。
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