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脊髓再生的问题一直是困扰神经科学的难题，近年来，随着生命科学领域各学科的快速发展，脊髓损伤的修复研究取得了很大的进展。促进脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)轴突再生与功能恢复的研究中，嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells, OECs)移植目前被认为是最有前景的方法之一，并且具有重要的临床应用价值。OECs是嗅觉系统的胶质细胞，一方面能够分泌多种神经营养因子、细胞基质成份和细胞粘连分子，为轴突再生提供适宜的微环境；另一方面可以与中枢神经系统(central nervous system, CNS)自然整合，形成细胞索支架，伴随并包裹再生轴突，使其避免与中枢再生抑制因素接触，并越过胶质瘢痕，引导轴突再生至特定的靶细胞形成突触，从而实现功能的重建。近年来不断有研究报告成功地运用OECs的移植促进损伤的脊髓轴突再生，并在脊髓全横断模型中取得了部分运动功能的恢复。 一、人胚胎嗅神经鞘细胞的体外培养 本研究共收集标本35例，均为3—6个月的水囊引产流产儿，采用原一代培养的方法，自人胚胎的嗅球培养出OECS。在原代培养后的第5、7、10、15、ZI、30天，行抗 NGFR P75（1：200，武汉博士德公司）SABC免疫组织化学染色、鉴定细胞并计算细胞阳性率。结果表明OECS的纯度在原代培养的第历天最高，可达9肌，而且细胞数量最多：标本在4℃下保存6小时后进行细胞培养，其结果与取材后立即做原代培养无明显差异。结论：自人胚胎培养 OECS的方法实用可行，方法简单，原代培养 15天的OEC是进行移植的最佳时机，为利用OECS修复脊髓损伤进入临床提供实验基础。二、碱性成纤维细胞生长因子（B S c f i brob旧st growth factor，bFGF）对体外培养大鼠OECS生长的作用 采用原代培养的方法，从2．5月的成年SD大鼠的嗅球分离培养OECS，接种于24孔培养板中，在原代培养第7天，在各组培养孔中加入不同浓度（20ng／ml、10ng／ml、sng／ml）的bFGF，作用72小时，镜下计数，与加bFGF前做比较，求得处理前后细胞增殖率。对各组结果进行统计学分析，结果表明加bFGF组比对照组的细胞增值率明显升高（P＜0．05），而且这种促进作用存在浓度依赖性，10ng／ml这个作用浓度比其他两个浓度的促进作用更明显（P＜0．05），其他两组之间差异无统计学意义；加M阶后各试验组OECS阳性率与对照组比较差异无统计学意义（P）0．05）。结论：bFGF具有促进OECS增值的作用，但不影响OECS的纯度，bFGF的这种作 一3一——用对OECS的临床实际应用具有非常重要的指导作用。