暗纹东方鲀Takifugu obscurus,俗称河鲀,隶属鲀形目（Tetraodontiformes）,鲀科（Tetraodontidae）,东方鲀属（Tikifugu）,主要分布在我国的东海、黄海及通海的江河水域,具有海淡水生殖洄游习性。暗纹东方鲀生长速度快、肉质鲜嫩、营养价值高,是我国目前主要的养殖河鲀种类。近年来,由于海洋污染、水域生态破坏等原因导致野生暗纹东方鲀的资源量下降严重,2000年开始,部分江段已经采集不到亲鱼,暗纹东方鲀资源的养护管理迫在眉睫,人工增殖放流能够修复海洋生态环境,是补充和恢复水生生物资源的重要手段。本文针对暗纹东方鲀标志放流过程中麻醉剂的确定使用、标记方法选择等问题,通过开展麻醉剂有效质量浓度、麻醉水温、麻醉后滞空时间对暗纹东方鲀幼鱼的麻醉效果影响、麻醉剂对幼鱼呼吸频率及血液肝脏中酶和激素等生理生化指标的影响、T-bar标志技术和标记部位的适宜性选择等实验对暗纹东方鲀幼鱼进行了系统研究,旨在为长江口暗纹东方鲀资源的增殖养护提供基础数据和技术支撑。1.MS-222和丁香酚对暗纹东方鲀幼鱼的麻醉效果研究为研究MS-222和丁香酚对暗纹东方鲀幼鱼的麻醉效果,选择重量为（71.37±3.24）g的幼鱼进行实验,根据暗纹东方鲀幼鱼麻醉和复苏时的主要行为特征,将麻醉过程分为6期,复苏过程分为4期。结果显示:麻醉剂的浓度与幼鱼的麻醉时间呈负相关,与复苏时间呈正相关,即随着两种麻醉剂浓度的升高,幼鱼的麻醉时间逐渐缩短,复苏时间逐渐增加;当MS-222和丁香酚的浓度分别为60 mg·L^-1和30 mg·L^-1时,幼鱼的最终麻醉程度能达到麻醉6期（延髓麻醉期）;当MS-222浓度为120～140 mg·L^-1、丁香酚浓度为60～70 mg·L^-1时,幼鱼均可在3 min内麻醉、5 min内复苏;幼鱼的麻醉时间和复苏时间与麻醉水温呈负相关,即随着水温的上升,幼鱼的麻醉时间和复苏时间逐渐降低;幼鱼进入麻醉6期后,暴露5min之前,随着在空气中暴露时间的增加幼鱼的复苏时间逐渐降低,麻醉效果较好,暴露5 min后幼鱼的复苏时间逐渐增加,暴露30 min时,幼鱼复苏时间已超过300s;丁香酚组幼鱼复苏时间随暴露时间延长持续上升,暴露2 min复苏时间已超过300 s,暴露6 min后复苏时间上升趋势加快,暴露15 min幼鱼成活率为100%,复苏时间已超过500 s,暴露20 min时幼鱼成活率降低到80%。研究认为:MS-222浓度达到120～140 mg·L^-1和丁香酚浓度达到60～70 mg·L^-1时均对暗纹东方鲀幼鱼有良好的麻醉效果,具有麻醉时间短、复苏快的特点,水温在16～24℃时,随着水温升高,麻醉效果增强,在增殖放流标记过程中若需在空气中滞留较长时间,可优先选择MS-222作为麻醉剂。2.MS-222和丁香酚对暗纹东方鲀幼鱼呼吸频率、生理及生化指标影响研究为探究MS-222和丁香酚对暗纹东方鲀幼鱼麻醉前后生理生化指标的变化情况,选择体质量（93.37±4.12）g的幼鱼,在水温（21.90±0.10）℃条件下,分别测定麻醉和复苏过程中呼吸频率的变化及麻醉前、深度麻醉和复苏1 h后幼鱼血液皮质醇（COR）含量和肝脏谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的活性。结果显示:暗纹东方鲀幼鱼在MS-222和丁香酚麻醉后呼吸频率呈现先加快后变慢趋势,MS-222组呼吸频率在麻醉2期达最高,为（198.75±2.58）次/min,丁香酚组的呼吸频率在麻醉1期时最高,为（186.7 5±2.86）次/min,复苏过程中两组幼鱼的呼吸频率逐渐加快,达到复苏4期时MS-222组幼鱼呼吸频率和丁香酚组均与麻醉前水平较为接近;MS-222和丁香酚对幼鱼的血液皮质醇、肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量均有显著影响（P<0.05）,MS-222和丁香酚两组幼鱼的血液皮质醇含量在深度麻醉时分别高达（11.23±0.20）ng·mg^-1和（10.12±0.25）ng·mg^-1,显著高于麻醉前水平（6.48±0.26）ng·mg^-1（P<0.05）,复苏后1 h分别降到（10.12±0.15）ng·mg^-1和（9.20±0.17）ng·mg^-1,均未恢复至麻醉前水平,丁香酚组幼鱼的血液皮质醇含量波动比MS-222组小;MS-222和丁香酚两组幼鱼的肝脏谷丙转氨酶含量在深度麻醉时分别高达（32.25±0.23）U·g^-1和（25.66±0.59）U·g^-1,显著高于麻醉前水平（19.05±0.97）U·g^-1（P<0.05）,复苏后1 h分别降到（27.24±0.58）U·g^-1和（24.62±1.52）U·g^-1,均未恢复至麻醉前水平;两组幼鱼的肝脏谷草转氨酶含量在深度麻醉时分别高达（18.44±1.98）U·g^-1和（17.22±1.66）U·g^-1,显著高于麻醉前水平（9.52±0.66）U·g^-1（P<0.05）,复苏后1 h分别降到（14.78±1.56）U·g^-1和（13.22±1.33）U·g^-1,均未恢复至麻醉前水平,丁香酚组幼鱼的肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性波动比MS-222组小。研究认为:综合幼鱼呼吸频率、血液皮质醇激素及肝脏谷丙和谷草转氨酶活性等生理生化指标而言,丁香酚对幼鱼机体和肝脏损害更轻,更适合暗纹东方鲀幼鱼的短距离运输、生产养殖等领域。3.暗纹东方鲀幼鱼T-bar标志技术与标记部位适宜性选择研究为提高暗纹东方鲀放流成活率和标记回捕率,在麻醉剂研究的基础上,开展了不同的标记部位对暗纹东方鲀幼鱼生长和摄食的影响实验。3组幼鱼分别在头部和背鳍间肌肉（A组）、背鳍和尾鳍间肌肉（B组）、臀鳍和尾鳍间肌肉（C组）注射T型体外悬挂标记,设置对照组O,通过鱼体成活率、标记脱落率、体长增长率、体质量增长率、摄食率和特定生长率等指标评价标记部位的优劣。结果显示:不同标记部位对幼鱼的成活率及脱标率有显著影响（P<0.05）,幼鱼成活率O组>B组>C组>A组,A、B、C三组的成活率显著低于对照组（P<0.05）,其中B组成活率最高,为（89.77±3.24）%;脱标率A组=B组B组>C组>A组,O组和B组无显著性差异（P>0.05）,显著高于A组和C组（P<0.05）,体质量增长率O组>B组>A组>C组,O组和B组无显著性差异（P>0.05）,显著高于A组和C组（P<0.05）,摄食率O组>A组>B组>C组,O、A和B三组无显著性差异（P>0.05）,显著高于C组（P<0.05）,特定生长率O组>B组>A组>C组,O组和B组无显著性差异（P>0.05）,显著高于A组和C组（P<0.05）。综上所述,暗纹东方鲀幼鱼增殖放流时标记应注射在B部位,即背鳍和尾鳍间肌肉处,同时为错过标记脱落高峰期,提高标记回捕率放流前需暂养15～20 d。