【摘 要】
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本实验的目的是观察高渗液(HS)对缺氧/复氧的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。通过体外分离和培养HUVECs,将细胞分为对照组和实验组,采用荧光探针
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本实验的目的是观察高渗液(HS)对缺氧/复氧的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。通过体外分离和培养HUVECs,将细胞分为对照组和实验组,采用荧光探针技术,应用激光共聚焦显微镜,测定细胞内[Ca2+]i的变化,两组细胞先置于缺氧(95%氮气,5%C02)环境中8h,然后将实验组细胞置于配制好的HS中15min,再在常氧状态下(95%空气,5%C02)培养16h。对照组细胞加对照液(M199培养液)15分后置于常氧状态下(95%空气,5%C02)培养16h。两组细胞分别于缺氧前(T0)、缺氧后(T1)、处理后(T2)、复氧后1/2h、2h、8h、16h(T3-6)测定细胞内Fluo-3荧光强度。结果显示:细胞荧光强度在T1显著升高(P<0.05);实验组T2与T1及对照组T2相比均显著降低(P<0.05),但仍高于T0(P<0.05),且复氧过程中逐渐降低,至T5恢复到T0水平,2组细胞T3时点荧光强度均高于各自组T2时点(P<0.05),实验组复氧过程中不同时段(T3-6)比各自同一时间段的对照组荧光强度低(P<0.05),对照组T4升至最高,T5,T6时段比较T4有降低(P<0.05)但仍高于T0水平P<0.05)。证实了:缺氧/复氧可以引发HUVECs内[Ca2+]i升高,而HS能缓解HUVECs内的钙超载,保护缺氧/复氧损伤的内皮细胞。
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