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随着规模化养猪业的发展，我国已相继出现多种新的猪传染病，包括猪繁殖与呼吸综合征，副猪嗜血杆菌和猪圆环病毒Ⅱ型感染等，并已引起严重的经济损失。研制抗猪免疫球蛋白的单克隆抗体，对研究这些猪病的免疫特性、诊断和防制技术有重要意义。 本研究采用饱和硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析和离子交换柱层析技术分别从猪初乳和血清中提取SIgA和IgM。经SDS-PAGE电泳鉴定，纯化的SIgA和IgM达到了电泳纯。以此纯化的SIgA和IgM，分别采用长程免疫法免疫BALB／c小鼠，取4次免疫后的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合，建立间接ELISA，用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体(Mabs)。在制备抗猪SIgA Mabs中，进行了两次细胞融合，两次的融合率分别为79.7％和60.3％；初检阳性率分别为4.1％和16.8％。制备抗猪IgM Mabs时，进行了一次融合，融合率达80％，初检阳性率为100％。经2次亚克隆反复筛选共获得了2株能稳定分泌抗猪SIgA单克隆抗体的杂交瘤细胞株；命名为CA6和5D4；5株抗猪IgM杂交瘤细胞株，分别命名为M1、M2、C1，D1和H2。CA6杂交瘤细胞株经反复冻存、复苏及多次传代，均能分泌高效价抗体，且为IgM κ型；间接ELISA和Western-blot证实所获得单抗是特异性针对SIgA；CA6杂交瘤细胞培养上清和小鼠腹水单抗ELISA效价分别为1：128和1：6400-1：12800；腹水单抗经PEG6000沉淀法提纯后，蛋白含量为4.26mg／ml。M1和M2杂交瘤细胞株经反复冻存、复苏及多次传代，均能分泌高效价抗体，且为IgG1 κ型。间接ELISA和Western-blot进一步证实所获得的单抗只与猪IgM μ链反应，而与IgG，IgA以及IgM轻链均呈阴性反应。M1和M2杂交瘤细胞培养上清和小鼠腹水单抗ELISA效价分别为1：256和1：12800-1：25600；腹水单抗经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后，蛋白含量为4.84mg／ml。 利用过碘酸钠法分别对提纯后抗猪SIgA、IgM腹水单抗进行辣根过氧化酶(HRP)标记，直接ELISA表明，相应的单抗Ig-HRP最佳工作浓度分别为：1：200和1：300。以纯化的抗猪IgM腹水单抗为抗原，单抗Ig-HRP为二抗建立双夹心ELISA(DAS-ELISA)检测猪IgM。其结果表明，该方法灵敏度高、特异性强，能检测IgM含量至少达到2ug／ml。 本研究所获得的抗猪SIgA单抗将对检测猪粘膜免疫水平及SIgA提纯发挥重要作用。获得的抗猪IgM单抗对猪病早期诊断以及对猪血液中IgM类表面抗原受体的B细抗猪slgA、IgM单克隆抗体及其醉标记抗体的研制胞的定童分析等方面将发挥重要作用.