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作为人血清蛋白质中两种非常重要的蛋白质:转铁蛋白和白蛋白,其含量水平对于炎症、冠心病、贫血等疾病的诊断,疾病标志物的发现,人在病理条件下的机理研究等方面意义重大。为准确定量分析人血清转铁蛋白、白蛋白,开发基于电感耦合等离子体质谱ICP-MS联用技术的定量方法很有必要,能进一步提高我国生命科学的测量水平,深入开展测量溯源性研究。本工作的主要内容包括:(1) HPLC-ID-ICP-MS定量方法的建立:以四种混合标准蛋白作为样品,建立了柱后同位素稀释法与高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用的定量方法。(2)人血清液相分离条件的确定:从色谱柱的选择、时间程序、流动相组成等方面进行实验优化,确定了人血清成功分离转铁蛋白Tf、白蛋白Alb的液相分离条件。(3)人血清中Tf、Alb的定量分析:将建立的HPLC-ID-ICP-MS定量方法应用到人血清中Tf、Alb的同时定量分析,柱后同位素稀释法时,采用富集同位素34S、54Fe的混合溶液作为稀释剂,通过硫、铁元素的同时检测,对血清中Tf进行了硫、铁共同定量;采用改变34S稀释剂流速的方法,对血清中Tf、A1b进行同时定量分析;以人血清蛋白标准物质(ERM-DA470/IFCC)为样品,对建立方法定量的准确性、可靠性进行验证。(4)聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离人血清条件的确定。(5)电泳后同位素稀释条件的确定:通过激光烧蚀进样电感耦合等离子体质谱(LA-ICP-MS)评价三种不同的34S稀释剂添加方式后发现,将电泳后的凝胶条带浸泡在34S稀释剂中可成功在凝胶上引入34S稀释剂信号,对不同34S稀释剂浓度及浸泡时间进行实验优化。(6)将建立的电泳后同位素稀释法与PAGE-LA-ICP-MS方法结合,对人血清中Tf、Alb进行定量分析,采用人血清蛋白标准物质进行方法验证。本工作通过大量的实验研究,分别建立了基于ICP-MS联用技术的HPLC-ID-ICP-MS、PAGE-LA-ID-ICP-MS定量方法,并确定了人血清中转铁蛋白Tf、白蛋白A1b的液相色谱分离、凝胶电泳分离条件,最终将定量方法应用到这两种血清蛋白质的定量分析,并用人血清蛋白标准物质对两种定量方法进行验证。实验结果表明:基于ICP-MS联用技术的两种定量方法,适用于基体样品人血清中多种蛋白质的准确定量分析。