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柑橘花（Citrus sinensis L. Osbeck），柑橘属芸香科下属植物柑橘果树的花，在我国资源丰富，作为一种传统食用花卉，其香味轻淡、纤巧、清新，深受人们喜爱，传统中医药学上具有催眠、顺气提神、安抚调节情绪作用。但目前尚未有对柑橘花多酚属性及其功效机制的研究。因此，本论文以北碚447锦橙花为原料，采用国标法分析其基本营养成分，HS-SPME-GC-MS法分析香气成分；并通过80%冷冻丙酮提取多酚物质，采用UPLC-ESI-TOF-MS和HPLC-DAD法对多酚组成进行定性定量分析，采用DPPH、FRAP法对其体外抗氧化活性进行评价；采用D-GalN/LPS诱导KM小鼠急性肝损伤为模型，研究不同剂量柑橘花多酚对急性肝损伤的保护作用及其作用机制。主要研究结果如下：
（1）柑橘花含有一定的营养价值，可作为一种新的食品资源。除水分外，碳水化合物是柑橘花全花中最丰富的常量营养素（16.82 g/100 g），脂肪和蛋白质含量分别为1.23 g/100 g和0.86 g/100 g，并能提供一定的能量（约47.39 kcal/100 g）。此外，柑橘花富含膳食纤维，其总膳食纤维约8.62 g/100 g。另外，柑橘花含有丰富的氨基酸，柑橘花全花总氨基酸含量为310.446 mg/100 g，其中总必需氨基酸含量达112.616 mg/100 g ，而亮氨酸是最为丰富的必需氨基酸（ 24.926 mg/100 g），非必须氨基酸中以天门冬氨酸和脯氨酸较为丰富（分别为45.762 mg/100 g和43.406 mg/100 g）。此外，对柑橘花四个部位（花瓣、花托、雌蕊、雄蕊）的香气成分进行分析，共鉴定出26种成分，其中，烃类和醇类是柑橘花的主要香气类物质；花瓣、花托、雌蕊挥发性香气成分以芳樟醇、桧烯、柠檬烯、β-月桂烯、α-罗勒烯为主，而雄蕊以芳樟醇、桧烯、橙花叔醇、β-月桂烯为主。
（2）柑橘花富含植物多酚，是生物活性多酚的丰富来源。柑橘花全花游离酚、结合酚、总酚含量分别为5.075、1.140、6.215 mg GAE/g；游离酚是柑橘花多酚的主要存在形式，约占总酚含量的81.7%。柑橘花四个部位多酚含量差异显著（P＜0.05），其中，雌蕊中的游离酚、结合酚、总多酚含量均显著高于其他三个部位（分别高达15.376、6.406、21.782 mg GAE/g）；而花瓣与雌蕊中多酚含量无显著性差异（P＜0.05），均显示为最低。采用UPLC-ESI-TOF-MS共分析出43种酚类物质，包括13种花青素、13种类黄酮、16种酚酸及其衍生物和一种香豆素类。柑橘花全花游离酚含量最高的是儿茶素（达637.5 ± 48.6 μg/g），其次是山奈酚（269.2 ± 43.7 μg/g）和芦丁（195.9 ± 6.8 μg/g）；全花结合酚含量最高的是白藜芦醇（约92.8 ± 3.0 μg/g），其次是原儿茶酸（85.1 ± 4.6 μg/g）。
（3）柑橘花游离酚和结合酚均具有一定的抗氧化活性。其中全花游离酚、结合酚的DPPH自由基清除活性EC50值分别为73.09、116.57 μg/mL；铁离子还原能力（FRAP）EC50值分别为113.58、159.23 μg/mL。柑橘花四个部位中，花瓣游离酚、结合酚清除DPPH自由基能力均最强（EC50值分别为51.26 μg/mL和75.14 μg/mL）；对于FRAP实验，花瓣游离酚还原铁离子能力显著强于其他部位（EC50值为98.88 μg/mL），结合酚中花托与雄蕊EC50值最高（均约为75.14 μg/mL）。整体而言，游离酚的抗氧化能力比结合酚更强，柑橘花四个部位中花瓣的抗氧化能力最强。
（4）柑橘花多酚提取物对D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤KM小鼠具有保护作用。与模型组相比，每日灌胃水飞蓟素的PC组和灌胃柑橘花多酚的P-M、P-H组（500、1000 mg/kg）小鼠血清和肝脏TC、TG含量及ALT、AST活力均显著降低（P＜0.05）；SOD、CAT、T-AOC、GSH-Px活力和GSH含量显著升高；肝脏TNOS、MPO、PCO、LDH酶活、MDA、NO、iNOS、IL-6、TNF-α、COX-2含量显著降低。
（5）柑橘花多酚提取物能够抑制D-GalN/LPS激活的Nrf2/ARE和NF-κB信号通路。与模型组相比，PC、P-M、P-H组小鼠肝脏胞浆Nrf2与Keap-1蛋白表达显著上升，而核内Nrf2、Maf和HO-1蛋白表达均显著下降（P＜0.05）；胞浆NF-κB、IκB、PPAR-α和PPAR-γ蛋白表达显著上升，而核内NF-κB蛋白表达显著下降（P＜0.05）；核内COX-2蛋白表达分别约降低了39.96%、31.76%和50.45%，但均不呈显著性（P＜0.05）。
综上所述，柑橘花具有一定的营养价值，香气丰富，富含酚类化合物，且具有较强的抗氧化活性。柑橘花多酚提取物对D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤KM小鼠具有保护作用，且这种保护作用可能是基于CFP的抗氧化活性，其作用机制可能是通过干预Nrf2/ARE和NF-κB信号通路共同发挥对小鼠急性肝损伤的保护作用，即：一是作为抗氧化剂替代肝脏内源性抗氧化防御能力，显著减弱D-GalN/LPS激活的Nrf2信号通路，从而抑制D-GalN/LPS诱导的小鼠肝脏氧化应激；二是通过激活PPARs通路抑制NF-κB核内表达，从而抑制D-GalN/LPS诱导的小鼠肝脏炎症。
（1）柑橘花含有一定的营养价值，可作为一种新的食品资源。除水分外，碳水化合物是柑橘花全花中最丰富的常量营养素（16.82 g/100 g），脂肪和蛋白质含量分别为1.23 g/100 g和0.86 g/100 g，并能提供一定的能量（约47.39 kcal/100 g）。此外，柑橘花富含膳食纤维，其总膳食纤维约8.62 g/100 g。另外，柑橘花含有丰富的氨基酸，柑橘花全花总氨基酸含量为310.446 mg/100 g，其中总必需氨基酸含量达112.616 mg/100 g ，而亮氨酸是最为丰富的必需氨基酸（ 24.926 mg/100 g），非必须氨基酸中以天门冬氨酸和脯氨酸较为丰富（分别为45.762 mg/100 g和43.406 mg/100 g）。此外，对柑橘花四个部位（花瓣、花托、雌蕊、雄蕊）的香气成分进行分析，共鉴定出26种成分，其中，烃类和醇类是柑橘花的主要香气类物质；花瓣、花托、雌蕊挥发性香气成分以芳樟醇、桧烯、柠檬烯、β-月桂烯、α-罗勒烯为主，而雄蕊以芳樟醇、桧烯、橙花叔醇、β-月桂烯为主。
（2）柑橘花富含植物多酚，是生物活性多酚的丰富来源。柑橘花全花游离酚、结合酚、总酚含量分别为5.075、1.140、6.215 mg GAE/g；游离酚是柑橘花多酚的主要存在形式，约占总酚含量的81.7%。柑橘花四个部位多酚含量差异显著（P＜0.05），其中，雌蕊中的游离酚、结合酚、总多酚含量均显著高于其他三个部位（分别高达15.376、6.406、21.782 mg GAE/g）；而花瓣与雌蕊中多酚含量无显著性差异（P＜0.05），均显示为最低。采用UPLC-ESI-TOF-MS共分析出43种酚类物质，包括13种花青素、13种类黄酮、16种酚酸及其衍生物和一种香豆素类。柑橘花全花游离酚含量最高的是儿茶素（达637.5 ± 48.6 μg/g），其次是山奈酚（269.2 ± 43.7 μg/g）和芦丁（195.9 ± 6.8 μg/g）；全花结合酚含量最高的是白藜芦醇（约92.8 ± 3.0 μg/g），其次是原儿茶酸（85.1 ± 4.6 μg/g）。
（3）柑橘花游离酚和结合酚均具有一定的抗氧化活性。其中全花游离酚、结合酚的DPPH自由基清除活性EC50值分别为73.09、116.57 μg/mL；铁离子还原能力（FRAP）EC50值分别为113.58、159.23 μg/mL。柑橘花四个部位中，花瓣游离酚、结合酚清除DPPH自由基能力均最强（EC50值分别为51.26 μg/mL和75.14 μg/mL）；对于FRAP实验，花瓣游离酚还原铁离子能力显著强于其他部位（EC50值为98.88 μg/mL），结合酚中花托与雄蕊EC50值最高（均约为75.14 μg/mL）。整体而言，游离酚的抗氧化能力比结合酚更强，柑橘花四个部位中花瓣的抗氧化能力最强。
（4）柑橘花多酚提取物对D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤KM小鼠具有保护作用。与模型组相比，每日灌胃水飞蓟素的PC组和灌胃柑橘花多酚的P-M、P-H组（500、1000 mg/kg）小鼠血清和肝脏TC、TG含量及ALT、AST活力均显著降低（P＜0.05）；SOD、CAT、T-AOC、GSH-Px活力和GSH含量显著升高；肝脏TNOS、MPO、PCO、LDH酶活、MDA、NO、iNOS、IL-6、TNF-α、COX-2含量显著降低。
（5）柑橘花多酚提取物能够抑制D-GalN/LPS激活的Nrf2/ARE和NF-κB信号通路。与模型组相比，PC、P-M、P-H组小鼠肝脏胞浆Nrf2与Keap-1蛋白表达显著上升，而核内Nrf2、Maf和HO-1蛋白表达均显著下降（P＜0.05）；胞浆NF-κB、IκB、PPAR-α和PPAR-γ蛋白表达显著上升，而核内NF-κB蛋白表达显著下降（P＜0.05）；核内COX-2蛋白表达分别约降低了39.96%、31.76%和50.45%，但均不呈显著性（P＜0.05）。
综上所述，柑橘花具有一定的营养价值，香气丰富，富含酚类化合物，且具有较强的抗氧化活性。柑橘花多酚提取物对D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤KM小鼠具有保护作用，且这种保护作用可能是基于CFP的抗氧化活性，其作用机制可能是通过干预Nrf2/ARE和NF-κB信号通路共同发挥对小鼠急性肝损伤的保护作用，即：一是作为抗氧化剂替代肝脏内源性抗氧化防御能力，显著减弱D-GalN/LPS激活的Nrf2信号通路，从而抑制D-GalN/LPS诱导的小鼠肝脏氧化应激；二是通过激活PPARs通路抑制NF-κB核内表达，从而抑制D-GalN/LPS诱导的小鼠肝脏炎症。