【摘 要】
：
本研究的目的是为了研究融合型自杀基因Fcy∷Fur联合5-FC对胶质瘤细胞C6的杀伤作用。根据逆转录病毒表达载体pLXSN的多克隆位点及质粒pORF5-Fcy∷Fur上Fcy∷Fur的基因序列，设
论文部分内容阅读
本研究的目的是为了研究融合型自杀基因Fcy∷Fur联合5-FC对胶质瘤细胞C6的杀伤作用。根据逆转录病毒表达载体pLXSN的多克隆位点及质粒pORF5-Fcy∷Fur上Fcy∷Fur的基因序列，设计PCR引物，在引物的5’端分别引入EcoR I和BamH I酶切位点，采用常规PCR从pORF5-Fcy∷Fur中扩增出Fcy∷Fur融合基因，经核酸序列测定正确后，分别克隆进pLXSN。经双酶切鉴定无误后，转染包装细胞PT67，扩大培养阳性克隆并收集上清，获得重组逆转录病毒。重组病毒感染靶细胞C6，以G418筛选得到稳定表达Fcy∷Fur的阳性细胞株，并经抽提细胞基因组DNA和RNA分别进行PCR和RT-PCR等鉴定目的基因的整合。在稳定表达Fcy∷Fur的C6细胞中加入5-FC，MTT法测定肿瘤细胞杀伤效应并计算细胞生长抑制率、免疫组化检测凋亡相关蛋白Fas及Bcl-2的表达、流式细胞仪检测细胞凋亡比例及电镜观察等方面来研究对肿瘤细胞杀伤情况。裸鼠皮下移植C6-Fcy∷Fur、C6-PLXSN及C6细胞后腹腔注射5-FC或PBS液，比较裸鼠生存期及肿瘤大小，并观察流式细胞仪检测结果及电镜下表现。结果显示：融合型自杀基因Fcy∷Fur联合5-FC在体内外可对胶质瘤细胞C6产生明显的杀伤作用，与对照组相比，细胞增殖明显受抑制；电镜下可观察到凋亡小体；流式细胞仪检测实验组细胞凋亡率
其他文献
鼓浪屿是我国著名的风景名胜区,历史国际社区,同时也是年轻的世界文化遗产。世界文化遗产是全世界人民的共同财富,但是近年来有些重要的世界文化遗产因与旅游发展不协调而遭受破坏,如我国故宫、长城等,因此世界文化遗产保护与旅游发展之间的矛盾一直都是国内外学者非常关注的课题。近年来鼓浪屿旅游发展迅速,而在被列为世界文化遗产后,如何促进其文化遗产保护与旅游发展相协调变得尤为重要,对其旅游发展有了更新的要求和思路
随着地理信息系统(Geographic Information System,GIS)数据库以及高效台式计算机的广泛使用,数据质量的控制问题成为人们日益关心的焦点。数字高程模型(Digital Elevation M
在众多高分子改性方法中,共混改性是获得新型高分子材料较为便捷的方法。对于熔融均相,冷却后相分离特征的结晶/非晶高分子共混物而言,其相行为丰富多样,具有极高的研究价值
唐山沿海区域先后建立了1954年北京坐标系、1980年西安坐标系以及WGS-84国家大地坐标系。唐山大地震后由于控制点的破坏,在1954年北京坐标的基础上建立了唐山独立坐标系。但
目的：后期促进因子可启动细胞周期素及其他姐妹染色体粘合过程的相关底物的降解。本研究旨在阐明APC的表达与临床病理变化见的相互关系，探讨APC在结直肠癌形成中的作用，估量外科
电力电子变压器已成为全球研究热点,高速列车轻量化更是发展趋势,车载电力电子变压器取代传统牵引传动系统中的牵引变压器和四象限整流器是未来之必然。双向DC-DC变换器作为车载电力电子变压器的核心组成部分,其功率密度的高低、能耗的大小以及是否能够稳定运行,对车载电力电子变压器的性能优劣起着至关重要的作用。本文研究的全桥三电平双向DC-DC变换器具有耐压高、耐流大的优势,更适合在大功率场合中的工程实现,研
目的本研究目的是分析肾透明细胞癌(ccRCC)患者中血清25(OH)D水平与肾IL-6/STAT3信号激活之间的相关性,并检测ccRCC患者中不同的病理分级与IL-6/STAT3信号激活之间的关系。方法收集2013-2014年43名新诊断的ccRCC患者和86名年龄和性别与之相匹配的对照组人群。通过放射免疫测定法(RIA)测量血清25(OH)水平,通过酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-6
目的 以PTEN为靶点比较人胶质瘤细胞SWO38及其克隆亚系SWOZ1和SWOZ2在基因水平表达的差异,探讨胶质瘤异质性的分子机制。 方法 (1) 应用RT-PCR法扩增人胶质瘤细胞SWO38及S
背景和目的 随着激光诱发自体荧光(Laser-induced fluorescence，LIF)光谱和图像技术广泛的应用研究，它逐渐成为了一种很有发展潜力和应用前景的组织病理诊断的新工具。其原
目的:肝纤维化是病毒、药物、酒精、寄生虫、免疫等损伤以及代谢异常引起肝脏慢性炎症发展至肝硬化、肝癌的中间环节,是肝脏组织过度修复导致瘢痕生成的过程。在欧盟,有0.1%人口因肝硬化受到影响,肝组织病理改变严重者,约有17万人口因此而死亡[1]。我国是肝炎大国,肝病是最常见疾病之一,约占总人口10%为乙肝病毒携带者。肝纤维化及肝硬化给社会带来巨大的经济负担,当一般治疗无法满足病情需要时,肝移植成为最后