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哺乳动物SWI/SNF染色质重塑复合体，包含约10个蛋白质元件，包括Brg1、BAF155、BAF170、BAF60和BAF57，它们在转录调控中起重要作用。有研究发现BAF57与ER-α（雌激素受体）和AR（雄激素受体）之间存在着相互作用，并能辅助补充SWI/SNF染色质重塑复合体激活激素依赖的启动子转录活性。我们之前也发现BAF57在雌雄胚胎发育初期呈差异表达。本研究利用禽类逆转录病毒载体RCASBP结合U6启动子构建RNAi载体，同时对鸡BAF57基因进行RNAi，对其在性别分化和性腺发育过程中的作用及其调控网络进行探究。结果如下： 1.使用一步PCR法从9~11日龄白来航鸡的基因组DNA中扩增鸡U6启动子（cU6-4）及shRNA，从质粒pBI-EGFP中扩增GFP，随后与逆转录病毒RCASBP连接，构建完整RNAi病毒载体。经过病毒DNA转染、病毒包装、收集及提取等步骤，最终获得感染用病毒。结果表明，病毒载体构建成功。 2.利用包装获得的病毒，分别在细胞和鸡胚中进行感染，观察感染情况。结果显示，细胞感染效果良好，荧光表达强烈。在病毒转染后48~72h后，开始出现荧光表达，培养5~7天后可用于收集细胞，提取RNA，做半定量检测。鸡胚感染前，利用胶带剪切法开窗、处理鸡胚。之后注射病毒，培养5~7天后进行观察，可看到鸡胚有强烈的荧光表达，但感染鸡胚全部死亡。 3.收集感染后的细胞，提取RNA、反转录，半定量检测目的基因BAF57及相关性别分化基因——Sox9、Dmrt1、AMH和芳香化酶的表达量。结果表明，目的基因BAF57的表达水平下降，ER-α（雌激素受体）和AR（雄激素受体）的表达量也随之下降，Sox9的表达水平也出现下调，但没有检测到Dmrt1、AMH及芳香化酶基因的表达（DF-1细胞中没有表达）。 本研究成功利用了逆转录病毒载体进行RNAi，完成了对鸡性腺发育候选基因BAF57的初步研究，为进一步研究BAF57基因奠定了基础。同时，为实验室引进了逆转录病毒载体，完善了实验室RNAi技术的平台。