论文部分内容阅读
桑叶是一种传统的中草药,在我国具有丰富的资源,传统的桑叶只用于养蚕,用途单一,易造成资源过剩现象。多糖是桑叶中的主要化学成分之一,糖生物学研究成果表明,植物多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化等多种功效,因此,开发利用桑叶多糖具有理论价值和实际意义。本研究以浙江湖州产桑叶为试验材料,研究了桑叶多糖提取、分离纯化、结构鉴定及其降血糖活性。主要研究结果如下:采用响应面分析法优化了三种不同方法(普通水提法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法)提取桑叶多糖工艺。结果表明,普通水提法的优化工艺条件为:提取温度80℃,料液比1:1 7,提取时间85 min,提取2次,桑叶多糖的得率为4.67%。微波辅助提取法的优化工艺条件为:料液比1:25,提取时间11 min,提取功率436 W,桑叶多糖的得率为9.53%。超声波辅助提取法的优化工艺条件为:料液比1:15,提取时间20 min,提取温度80℃,提取功率60 W,桑叶多糖的得率为10.79%。相比普通水提法的多糖得率,微波辅助提取多糖得率提高了104%,超声波辅助提取多糖得率提高了131%,因此,将微波辅助提取法和超声波辅助提取法应用于工业化提取桑叶多糖具有较好的应用前景。通过考察多糖保留率、脱蛋白率和脱色率,比较了三种大孔树脂(AB-8、D101和D3520)对桑叶粗多糖的脱色和脱蛋白效果。研究结果表明,D3520为最佳脱色和脱蛋白大孔树脂。采用DEAESepharose FF离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶柱层析进一步分离桑叶多糖得到两个级分(MPS-1和MPS-2),并通过凝胶渗透色谱法和醋酸薄膜电泳法纯度分析确定MPS-1和MPS-2均为单一组分。采用化学方法初步研究了MPS-1和MPS-2的一级化学结构。红外光谱分析初步判断MPS-1和MPS-2为糖类化合物,且MPS-1比MPS-2含有较多的糖类特征官能团。高效凝胶色谱法测定了MPS-1和MPS-2的分子量分别为24898 D和61131 D。气相色谱分析表明MPS-1含有4种单糖的杂多糖,其组成为山梨糖、阿拉伯糖、木糖和葡萄糖,摩尔比为3:2:17:110;MPS-2是含有6种单糖的杂多糖,其组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖,其摩尔比为13.8:9.7:14.4:9.6:9.3:13.5。通过注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,研究了桑叶多糖降血糖活性。研究结果表明桑叶多糖具有降血糖作用,它能改善糖尿病小鼠消瘦和毛色暗淡等糖尿病症状,降低糖尿病小鼠血糖浓度,提高小鼠肝脏抗氧化功能,促进葡萄糖转变为肝糖原,减轻四氧嘧啶型小鼠胰岛损伤等作用。桑叶多糖的降血糖作用机制可能是通过提高机体抗氧化酶活性,清除活性氧自由基以解除自由基对肝脏和胰岛β细胞的修复和再生来实现的,具体的作用机理、桑叶多糖中的哪些组分起降血糖作用等问题还有待于进一步研究。