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免疫刺激剂作为化学治疗剂和疫苗添加剂在水产业已有较为广泛的应用,但其应用效果尚不是很清楚。本文初步探讨了四种多糖作为免疫刺激剂对史氏鲟(Acipenserschrenki)以及壳聚糖对氨暴露环境下中华鳖(Pelodiscussinensis)非特异性免疫功能的影响,结果如下:
1分别将四种不同来源的多糖(5mgml-1)腹腔注射到史氏鲟体内(35.9±5.7g,平均值±标准差),9天后,观测血液中淋巴细胞a-醋酸奈酯酶(a-naphthylacetateesterase,ANAE)活性作为细胞免疫(cellulardefensesystem)指标,血清溶菌活性(bacteriolyticactivity)和血清旁路补体途径溶血活性(ACPhemolyticactivity)作为体液免疫(humoraldefensesystem)指标,选用兔红细胞(RaRBC)为旁路补体途径(ACP)的激活因子。结果显示壳聚糖(chitosan)在几种多糖中免疫刺激作用最强。壳聚糖组与对照组相比,所有的免疫指标活性均有显著提高,ANAE活性和溶菌活性与其他实验组相比也有显著提高。水苏糖(stachyose),酵母多糖(yeastpolysaccharide)和脂多糖(LPS)与对照相比血清旁路补体途径溶血活性增强,而对ANAE活性和溶菌活性没有显著影响。
2采用壳聚糖作为免疫刺激剂,以不同浓度(0、1、5、50mgml-1生理盐水溶液)注射到饲养于总氨氮浓度(TAN)为110mgl-1水环境的中华鳖(21.0±5.0g,平均值±标准差)腹腔内,对照组只注射等量生理盐水溶液并饲养于新鲜晾晒自来水中。注射7天后观测外周血和脾脏中淋巴细胞ANAE活性、血清旁路途径溶血活性、血清溶菌活性作为免疫指标,外周血白细胞分型作为生理指标。与对照组相比,0mgml-1组外周血T淋巴细胞ANAE阳性率和血清旁路途径溶血活性均有显著提高,脾脏T淋巴细胞和血清溶菌活性没有显著变化。注射不同浓度壳聚糖后,与0mgml-1组相比,外周血T淋巴细胞阳性率和血清溶血活性均有不同程度显著下降,并且恢复到接近对照组的水平(P>0.05),只有50mgml-1组溶血活性显著低于对照组;注射壳聚糖对脾脏中T淋巴细胞ANAE活性没有显著影响。5mgml-1组溶菌活性显著高于其他组,其他各组间差异不显著。可见,壳聚糖对氨氮胁迫导致的免疫应激反应有一定的拮抗作用,其作用强度因壳聚糖浓度和免疫指标不同而异。
氨氮胁迫下各组与对照组相比,外周血中性粒细胞(heterophil)和嗜酸性粒细胞(eosinophil)比例上升,嗜碱性粒细胞(basophil)和淋巴细胞(lymphocyte)比例下降。氨氮胁迫下,中性粒细胞和淋巴细胞的比值(HLR)显著升高,注射壳聚糖对HLR值影响不大。0mgml-1组单核细胞(monocyte)比例显著高于其它各组,而其它各组问无显著差异。可见,氨氮胁迫会刺激中华鳖中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞比例增多,嗜碱性粒细胞和淋巴细胞比例减少。而注射壳聚糖对中华鳖白细胞比例影响不大。