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目的观察携带血管内皮生长因子165基因(vascular endothelialGrowth factor165gene,VEGF165)的腺病毒转染的血管内皮祖细胞(endothelialprogenitor cell,EPCs)移植治疗深静脉血栓后综合征(Post-thrombosis syndrome,PTS)的效果。方法:1、Ficoll梯度密度离心法(density gradient centrifugation)分离SD大鼠的骨髓单个核细胞,EBM-2培养基诱导、培养、扩增骨髓源性EPCs。2、人胚肾细胞293A(HEK293A)扩增腺病毒后转染EPCs。3、缩窄大鼠(300g左右)肾下段下腔静脉,以三氯化铁(ferric chloride)浸润建立下腔静脉血栓模型,随机分成四组,即:A组、B组、C组和D组,每组12只动物。4、术后3到5天取栓,经大鼠下腔静脉注射细胞,行移植实验:A组:注射lml×10~6/ml Ad.GFP.VEGFl65转染后EPCs细胞悬液;B组:注射lml×10~6/ml Ad.GFP转染后EPCs细胞悬液;C组:注射lml×10~6/ml单纯EPCs细胞悬液;D组:注射lml培养基。5、不同时间段取出血栓段下腔静脉,应用HE染色及vWF免疫组化染色CD34、VEGFR2、MMP-2、SMA等指标观察新生血栓机化、血管内膜修复情况;扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观测内膜修复状况。结果:1、EPCs可自骨髓单个核细胞诱导分化生成,传代后可成为晚期内皮祖细胞(late EPCs);2、以HEK293A细胞为载体扩增可以获得高滴度的腺病毒,并且转染EPCs效率高;3、三氯化铁构建大鼠下腔静脉血栓模型方法简便易行:4、基因修饰的EPCs移植能明显促进血栓后静脉内膜修复。结论:经VEGFl65转染的EPCs移植后明显促进静脉内膜的修复,从而改善了取栓后静脉内皮损伤。