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J亚群禽白血病是由反转录病毒科α肿瘤病毒属的J亚群禽白血病病毒（ALV-J）引起的以髓细胞瘤为主的肿瘤性疾病。我国于1999年首次从肉鸡中分离出该病毒，2004年从蛋鸡中分离出该病毒，此后陆续有地方鸡品种感染此病的报道。ALV-J自我国出现以来，其感染宿主范围不断扩大，发病日龄逐渐提前，导致的肿瘤类型不断增多，给我国的养禽业带来了严重的经济损失。目前对于ALV-J没有有效的预防和治疗手段，只有通过净化来建立无ALV-J鸡群。目前单一的ALV-J检测手段都存在不同的优缺点，建立一个ALV-J快速诊断体系评估鸡群ALV-J感染状态，可精确净化、减少误淘，对于禽业的健康发展具有重要的意义。本研究通过对抗原/抗体检测方法的研究建立了ALV-J诊断体系。ALV-J囊膜蛋白中的表面蛋白（SU）含有许多抗原表位，是区分病毒亚群检测禽白血病亚群特异性抗体的首选蛋白。以田间病例分离出的毒株作为模板，选取504bpgp85基因序列进行原核表达，将获得的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定分析，均在18KD处出现条带。以纯化的His-gp85蛋白为免疫原制备多克隆抗体，将多抗进行效价测定，效价分别为1:6.4万、1:25.6万和1:51.2万。将纯化后的目的蛋白倍比稀释包被于ELISA板，建立ALV-J间接ELISA抗体检测方法。检测间接ELISA与IDEXX试剂盒两种方法的匹配率为88%。通过建立的ELISA方法对山东境内鸡群进行血清流行病学调查，检测的所有品种中平均血清抗体阳性率8.3%（197/2367），说明ALV-J感染在我省鸡群中普遍存在。以纯化的His-gp85蛋白为免疫原免疫六周龄的Balb/C纯系雌性小鼠，进行单克隆抗体的制备。最终获得4株抗ALV-J单克隆抗体，分别命名为2D5、3C2、6F3和9G6。对四株单克隆抗体进行ELISA效价测定和IFA鉴定，测定效价分别为1:2048，1:1024，1:1024和1：1024，IFA鉴定显示出良好的特异性。以纯化的兔抗ALV-J IgG为包被抗体，效价最高的单抗2D5腹水纯化后IgG为第二抗体，优化ELISA检测条件，成功建立ALV-J抗原的夹心ELISA检测方法。用柠檬酸三钠还原法制备胶体金标记纯化后的目的蛋白，可获得稳定的免疫胶体金。通过实验优化试纸条的各项条件。检测制备的试纸条与ELISA方法的匹配率，检测结果为100%。通过以上所述ALV-J抗原/抗体检测法、ALV-J抗体试纸条检测法能快速、全面、有效的检测出鸡群的感染状态，对于无禽白血病鸡群的建立具有重要意义。