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原发性肝癌是肝癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，具有恶性程度高、易复发、预后差的特点，手术切除是治疗肝癌最有效的疗法；但5年内复发率高达有60～70%。根据最新统计，全世界每年新发肝癌患者约六十万，居恶性肿瘤的第五位。原发性肝癌按细胞分型可分为肝细胞型肝癌、胆管细胞型肝癌及混合型肝癌。榄香烯脂质体注射液是从姜科植物温郁金中提取的抗癌有效成分。其主要生物学活性为降低肿瘤细胞有丝分裂能力，诱发肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长。该药还能直接作用于细胞膜，使肿瘤细胞破裂，可以改变和增强肿瘤细胞的免疫原性，诱发和促进机体对肿瘤细胞的免疫反应。恩度（endostatin)主要成分为重组人血管内皮抑制素，为国家一类新药，作用于新生血管内皮细并抑制内皮细胞迁移，抑制肿瘤新生血管形成，阻断肿瘤细胞营养供应，加速癌细胞凋亡过程。目的：探讨榄香烯和恩度对于肝癌细胞的增殖和凋亡的影响。方法：1.噻唑蓝还原法（MTT法）观察榄香烯和恩度对HepG2细胞活性的影响：分组为榄香烯20μl/ml、40μl/ml、60μl/ml、恩度50μl/ml、100μl/ml、150μl/ml、榄香烯加恩度20μl/ml+50μl/ml、40μl/ml+100μl/ml、60μl/ml+150μl/ml,和空白对照组。分别在96孔板里培养24h、48h、72h.胰蛋白酶消化单层培养细胞，以每空1×104个细胞接种于96孔培养板中，每孔体积200微升，将培养板适宜条件下，培养一天后分别加假如上述药物浓度，同时设立4个复孔和一个空白对照，之后每种浓度都分别培养24h、48h、72h后，每孔加入20μl的MTT溶液（5mg/ml）,继续在孵养4h，终止培养，小心吸弃孔内上清液，每孔加入150dsmo,震荡2分钟，使甲臜充分溶解。在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值，肿瘤细胞活性=实验组光密度值/对照组光密度值×100%，计算各组活性。2.细胞周期检测：分组为榄香烯20μl/ml、40μl/ml恩度50μl/ml、100μl/ml榄香烯联合恩度20μl/ml+50μl/ml、40ul/ml+100ul/ml。以每空1×106个细胞接种于6孔培养板中，每孔体积1000μl，将培养板放入适宜条件下，培养一天后分别加入上述药物浓度，同时设立空白对照，分别放在6孔板里培养24h。之后分用胰酶消化收集，用PBS洗一遍,保留50μl的残液，其中的细胞数目大于1×105个；取细胞悬液50ul，加入到试管底部；加入100ul试剂A,与细胞悬液轻轻混匀，尽量避免产生气泡，室温孵育10min；加入100ul试剂B于上述试管中,轻轻混匀，尽量避免产生气泡，室温孵育10min；加入150ul试剂C于上述试管中,轻轻混匀，尽量避免产生气泡，室温孵育15min；之后流式细胞仪分析。3.细胞凋亡检测：分组为榄香烯20μl/ml、40μl/ml恩度50μl/ml、100μl/ml榄香烯联合恩度20μl/ml+50μl/ml、40μl/ml+100μl/ml。以每空1×106个细胞接种于6孔培养板中，每孔体积1000微升，将培养板放入CO2孵箱，在CO2孵箱，适宜条件下，培养一天后分别加入上述药物浓度，同时设立空白对照，分别放在6孔板里培养24h后终止培养，之后分别用胰酶消化收集,用PBS洗两遍（每一遍都离心）,收集细胞，1-5×103个细胞；加入500μl的Binding Buffer悬浮细胞；加入5μl Annexin V-FITC混匀后，加入5μlPropidiumIodide,混匀；室温、避光、反应15min；之后立刻用流式细胞仪检测，激发波长Ex=488nm,发射波长Em=530nm.结果：1.榄香烯对HepG2细胞有明显的生长抑制作用，且随着浓度和时间的增加，抑制呈增强作用，肿瘤细胞活性越低。浓度越高抑制作用越强，时间越长抑制越强。同时恩度（避光加药）对肝癌细胞HepG2的作用也是同样随着浓度和时间的增加，抑制呈增强作用，肿瘤细胞活性减低。浓度越高抑制作用越强，时间越长抑制越强。两者药物联合使用时有协同作用。所以说榄香烯和恩度对肝癌细胞都有明显抑制生长的作用；同时使用时作用呈协同性。2.榄香烯在肝癌肿瘤细胞周期中主要作用在G1期，因为在G1期细胞数目最多，可以理解为榄香烯把肝癌细胞阻止在G1期；恩度在肝癌细胞周期中在G1期细胞数目最多，说明主要作用在G2期，使肝癌细胞主要阻止在G2期。但是当榄香烯和恩度联合使用时，G1期细胞最多，说明两种药物作用使可以细胞阻止在G1期；其实也有一个方面可以说ELE作用在肿瘤细胞的G1期，把细胞阻止在G1期，但之后的细胞数目不多，有恩度作用,G2期细胞比后面几期数目多。3.榄香烯和恩度都有明显使肝癌细胞早期凋亡的作用，且两者都有随浓度的增强而作用增强，当两药合用时比单药诱导早期凋亡效果明显；结论：榄香烯和恩度都能抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞的凋亡，且呈现时间和剂量的依赖性；而且这两种药物对于细胞凋亡是协同作用。