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目的 研究胃癌标本及细胞株RNAs转染树突状细胞(DC)，诱导特异性CTL反应的方法，探讨获取胃癌标本或细胞株KNAs,直接转染DCs进行胃癌生物治疗的可能性，为胃癌的生物治疗提供一种新的思路，并为今后筛选胃癌差异表达基因转染DCs进行胃癌生物治疗奠定基础。 方法 对健康志愿者以rhGM-CSF50ug动员后，采集外周血，以淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMNC)，贴壁细胞(含DC)在细胞因子rhGM-CSF 800u／ml,rhIL-4 500u／ml条件下进行DC的培养扩增；以Trizol试剂盒从胃癌细胞株AGS和胃癌手术标本及癌旁组织分别直接抽提总RNAs用于转染DC,并设立空白对照；四种不同DCs体外刺激淋巴细胞，以MTT法观察不同来源RNAs转染DC所活化的淋巴细胞对AGS及视网膜母细胞瘤SoRb-70的体外杀伤效应。 结果 成功从胃癌细胞株AGS和胃癌及其癌旁组织提取到有较高纯度的完整RNAs,电泳显示清晰的18S和28S条带；经GM-CSF动员的健康志愿者外周血100ml分离到PBMNC 3.2×10~8，经体外培养扩增7天得到具有典型形态与表型的DC4.4×10~6，经AGS和胃癌标本RNAs直接转染后，成功诱导肿瘤特异性CTL反应，AGSRNA组CTL在靶效比为20：1时对AGS、SoRb-70的杀伤率分别为94.54％、1.53％。而胃癌RNAs组的杀伤率分别为92.88％、1.16％。正常组织RNA组杀伤率为8.77％、1.27％。空白对照组杀伤率为1.34％、1.70％。 结论 从胃癌及其癌旁组织和细胞株可以抽提到完整的RNAs；在无转染试剂存在的条件下，RNA可以成功转染DC；肿瘤RNA转染DC可以实现完全性抗原的加工递呈，诱导强烈的肿瘤特异性CTL反应。本研究及国内外研究表明肿瘤RNA转染DC治疗恶性肿瘤是一种有前景的治人胃癌细胞RNA转染树突状细胞诱导特异性抗肿瘤免疫的实验研究 摘 要一疗方法，而胃癌KNA转染DC治疗胃癌，无须知道明确的抗原成分，可以克服肿瘤标本污染的问题，使完全抗原负载DC治疗恶性肿瘤这一手段可以扩展到胃癌等污染比较严重的肿瘤，具有重要的现实意义。从胃癌手术标本直接提取RNA，直接转染DC，诱导特异性抗肿瘤免疫反应，在国内外尚属首例报道。