南极长城湾海洋沉积物及潮间带微生物的群落结构及宏基因组学研究

来源 :烟台大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:junshan_lmt
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本研究以南极长城湾海洋沉积物(Sed1、Sed2、Sed3)及潮间带(IT1、IT2)为实验样本,在传统分离培养手段基础之上,采用Miseq高通量测序技术和传统微生物分离培养方法,对沉积物和潮间带中的微生物群落进行研究,并且进一步认识微生物多样性、微生物生态学功能、环境影响因子这三者之间的相互关系。宏基因组技术,可以在认识极地海洋微生物群落结构的基础之上,进一步了解海洋微生物在南极海洋生态系统中的生态学功能,了解功能基因的多样性特征,透析微生物与环境之间的潜在关系。Miseq高通量测序技术对Sed1、Sed2、Sed3及IT1、IT2中的微生物多样性和群落结构进行初步研究,基于门、纲、属水平统计聚类分析探究南极长城湾附近丰富的微生物资源。5个样品共有的细菌门包括拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、放线菌门(Actinobacteria)和浮霉菌门(Planctomycetes)。共有细菌属为吕氏杆菌属(Lutibacter)、γ-变形杆菌属(Gammaproteobacteria)、小纺锤状菌属(Fusibacter)、海单胞菌属(Maritimimonas)和螺旋体菌属(Blastopirelilul)。假单胞菌属(Pseudomonas)是Sed1、Sed2、Sed3中优势菌属,球状菌属(Granulosicoccus)是IT1、IT2的优势菌属。真核微生物中色矛纲(Chromadorea)和硅藻纲(Diatomea)分别是是潮间带和沉积物的优势纲。通过构建沉积物样品(Sed1、Sed2、Sed3)及潮间带样品(IT1、IT2)功能基因克隆文库,利用宏基因组学方法对功能基因类型及其物种贡献度等进行分析,结果表明:对于新陈代谢(Metabolism)、特征缺乏(Poorly characterized)、细胞信息传递(Cellular processes and signaling)和信息的储存传递(Information storage and processing)4种功能贡献度最大的菌属为变形菌属(Proteobacterial)、拟杆菌属(Bacteroides)和放线菌属(Actinobacteria)。对二、三级功能基因的固碳菌属分析中,沉积物超过40%的比例为固碳菌属,潮间带均低于20%。影响因子关联分析中pH、Zn、Cu对于潮间带样品中的Ilumatobacter、Actinobacteria和Nocardiobe为主要影响因子。pH对潮间带样品IT1和IT2产生正影响,对沉积物样品Sed1、Sed2和Sed3产生负影响。利用R2A和2216E两种由海水配置的培养基对南极长城站潮间带样品IT1和IT2进行可培养细菌的分离纯化,共分离到142株细菌,对分离菌株16S rRNA基因进行PCR扩增、测序和序列比对,发现这些菌株来自4个门,分别是变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes),分布在20个属,变形菌门有80株,达到总分离株的56.3%;其次是拟杆菌门47株、放线菌门12株和厚壁菌门3株,占到比例33.1%、8.5%和2.1%。IT1样品分离菌株中变形菌门的细菌较多到达70%,分布在8个属。IT1中的优势属是Flavobacterium和Paraglaciecola。Sulfitobacter、Zhongshania、Psychromonas、Oceanisphaera、Gelidibacter、Cellulophaga、Aequorivita、Paeniglutamicibacter、Arthrobacter、Micrococcus、Planococcus是IT1样品的特有属。南极长城湾近岸海洋微生物群是由众多微生物组成的一个复杂群落,并且是南极陆地生态系统向海洋生态系统过渡的重要代表。相关成果对于深入认识微生物在极地海洋生态系统中的生态学地位、评估极地海洋微生物群落对全球气候变化的响应与反馈、以及保护极地生态环境安全等方面具有重要的科学参考意义。
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