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蛋黄ACE抑制肽是蛋黄蛋白质经碱性蛋白酶水解所得的短肽混合物,具有明显的体外降压作用。本实验的研究旨在经系列的分离纯化程序,得到具有活性的降压肽,为充分利用丰富的蛋黄蛋白质,提高鸡蛋利用价值和促进农业资源有效利用提供参考。酶解液脱色实验研究结果表明,加入1.5%活性炭、温度40℃、pH4.0的条件下脱色40min,脱色率达到83%,肽损失率5.6%。用截留分子量为10kDa和3.5kDa超滤膜初步分离脱色酶解液,一级、二级超滤溶液温度分别为40℃和30℃、水解液浓度6%和操作压力0.3MPa时2种超滤膜具有较好的通量,可分别达到19L·m-2·h-1和1.3L·m-2·h-1;分别检测不同分子量段溶液ACE活性抑制率,结果显示ACE抑制肽主要集中在分子量小于3.5kDa溶液中,ACE活性抑制率达到51.3%。分子量小于3.5kDa的超滤液用离子交换和凝胶层析分离。当乙酸钠缓冲液pH4.1,洗脱液离子强度为1mol·L-1 NaCl、进样量(肽的质量/树脂湿体积)为10mg·mL-1,洗脱温度35℃、流速控制在0.5mL·min-1时D61树脂具有较好分离效果,洗脱峰对ACE抑制活性提高到62.7%,肽的总回收率为82.4%。离子洗脱峰经Sephadex G-15凝胶层析分离。当缓冲液乙酸铵浓度为0.1 mol·L-1、洗脱液流出速度0.5mL·min-1、进样浓度40mg·mL-1的条件下,肽的总回收率有90%,洗脱组分5#峰具有最强的ACE抑制活性。洗脱组分5#峰经RP-HPLC反相制备色谱分离,可以得到12种组分,经活性检测,ACE抑制活性最强组分位于5#-a-a2,HPLC纯度达96%。放大实验表明,酶解工艺肽回收率81%;超滤放大肽回收率达76.8%;凝胶层析分离肽回收率达到68.8%。抗油脂氧化实验表明,油脂浓度为2.5%,ACEI浓度为0.02%时,ACE抑制肽与对照组具有相近的抗油脂氧化性。