目的:双链蛋白聚糖（Biglycan,BGN）在胃癌中存在异常表达,前期研究发现BGN在胃癌中的异常表达主要与胃癌的淋巴结转移、TNM分期及浸润深度有关,同时BGN可以通过FAK信号通路促进胃癌的转移能力并促进内皮细胞的小管形成,这提示BGN在胃癌中可能参与内皮细胞和肿瘤细胞的相互作用。肿瘤血管生成是肿瘤侵袭转移的关键步骤,本课题拟从BGN是否影响内皮细胞VEGF mRNA和蛋白表达研究入手,明确BGN对内皮细胞VEGF分泌的影响。通过双荧光素酶报告基因实验和Western-blot研究BGN调控VEGF促进胃癌血管生成进而促进胃癌转移的的分子机制。组蛋白甲基转移酶G9a在多种肿瘤中有异常表达,这提示G9a在肿瘤的发生发展中可能起到重要作用。本课题拟从胃癌组织和癌旁非肿瘤组织中G9a的表达水平研究入手,明确G9a在组织中的表达情况以及与临床病理之间的联系。通过上调和下调胃癌细胞中的G9a表达水平探索G9a对胃癌腹膜转移能力的影响,并建立实验动物模型进行验证。旨在揭示G9a在胃癌腹膜转移中的作用及其分子机制。方法:以ELISA和q RT-PCR方法检测BGN对内皮细胞VEGF表达的影响,并用ELISA法检测内皮细胞经TLR2/4单克隆抗体、sh HIF1α或NF-k B抑制剂PDTC处理后再经BGN刺激后VEGF的表达。用双荧光素酶报告基因实验和Western-blot及CHIP实验分析信号通路中上下游分子之间的相关关系及结合位点。内皮细胞小管形成实验、CCK-8法细胞增殖实验和transwell小室实验分别检测内皮细胞经TLR2/4单克隆抗体、sh HIF1α或PDTC处理后再经BGN刺激后内皮细胞的小管形成、增殖和迁移变化。最后用transwell共培养系统分析内皮细胞和胃癌细胞之间的相互作用。采用免疫组化（IHC）检测胃癌组织和癌旁非肿瘤组织中G9a表达水平并分析其与临床病理参数之间的关系。构建G9a过表达及敲低表达稳转胃癌细胞株,通过transwell实验、抗失巢凋亡实验、软琼脂形成实验和粘附实验检测G9a对胃癌细胞体外腹膜转移能力的影响,并建立裸鼠腹腔成瘤模型检测G9a对体内腹膜转移能力的影响。用蛋白免疫印迹（WB）检测相关通路基因表达变化;用双荧光素酶报告基因实验和染色质免疫共沉淀（Ch IP）检测蛋白与基因启动子区域相互作用;用免疫共沉淀（Co-IP）检测蛋白之间相互作用。结果:BGN刺激内皮细胞后增加了NF-k B和HIF-1α启动子之间的相互作用,导致HIF-1α启动子活性增强和HIF-1αmRNA水平增加,增强的HIF-1活性导致VEGF表达增加。所有这些都取决于BGN与其受体TLR2和TLR4的相互结合。同时,研究发现BGN可以通过TLR信号通路增强内皮细胞迁移和增殖以及小管形成。此外,内皮细胞分泌的VEGF被发现反过来作用于胃癌细胞并促进其迁移。相对于癌旁非肿瘤组织,组蛋白甲基转移酶G9a在胃癌组织中高表达,且胃癌组织中的G9a表达水平与胃癌淋巴结转移、TNM分期及患者较短的总体存期相关。体外和体内实验表明沉默G9a抑制了胃癌细胞的侵袭转移能力,而G9a的过表达有助于促进胃癌的侵袭转移能力。此外,Reg IV可以通过p-ERK/p-SP1通路诱导G9a表达。SP1直接结合在G9a启动子区域并增强其表达,上调的G9a可与P300和GR形成转录激活复合物,参与由地塞米松（DEX）诱导的ITGB3表达,促进胃癌的侵袭转移。然而,G9a参与由DEX诱导的ITGB3表达并不依赖于G9a的SET结构域和甲基转移酶活性。结论:胃癌细胞分泌的BGN作用于内皮细胞后通过TLR2（4）/NF-k B/HIF-1α信号通路引起内皮细胞的VEGF分泌,分泌的VEGF反作用于胃癌细胞引起胃癌细胞的迁移,进而促进了胃癌发展。G9a在胃癌组织中的表达明显升高,表达水平与肿瘤组织的淋巴结转移和TNM分期相关;上调G9a表达水平能促进胃癌细胞的侵袭转移能力,G9a表达下调后出现相反变化;G9a参与对ITGB3的调控参与了胃癌的侵袭转移过程。