本文研究证实HSC还与肝细胞的分化、代谢活性及再生能力等密切相关，HSC在细胞间相互作用中对肝实质细胞具有重要的支持作用，有助于肝细胞功能和活力的保持，其在BAL系统中潜在价值近年来已逐渐引起注意。然而，原代HSC的分离方法繁琐、产量较低，现有HSC系的种类有限且不易获得，这些都给研究工作造成很大困难.为此，本研究还开展了以SV40LT抗原基因编码序列诱导建立永生化HSC的研究，籍以满足研究工作对HSC的需求。 　　本文建立花费少、产率高且功能良好的成熟的肝细胞体外分离培养体系；建立长期传代、形态和生物学特性稳定的永生化HSC。在Seglen的原位胶原酶两步灌流法基础上进行改良，分离大鼠肝细胞采用0.02％低浓度胶原酶灌流，并用Percoll分离液进行密度梯度离心进一步纯化肝细胞，并以HepatoZYME-SFM为培养基，采用0.4％台盼蓝染色观察细胞活力。 　　本文通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养，建立了经济有效的肝细胞体外分离培养系统。在国内率先利用SV40LT抗原基因序列转染正常大鼠HSC建立了永生化HSC。新建永生化HSC在体外可无限传代，倍增速度快，在形态学上呈现正常HSC的星形外观。新建永生化HSC能表达SV40LTag，αSMA，Desmin，Ⅰ、Ⅲ型胶原及PDGFR-β、TGF-β1。